[發明專利]一種基于直接競爭熒光免疫法定量檢測葉酸功能化二氧化硅靶向納米藥物載體的方法

有效

• 申請號: 201710489337.7
• 申請日: 2017-06-24
• 公開（公告）號: CN107238710B
• 公開（公告）日: 2019-07-19
• 發明（設計）人: 張明翠;夏濛
• 申請（專利權）人: 安徽師范大學
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/533;G01N33/535;G01N21/64
• 代理公司: 蕪湖安匯知識產權代理有限公司 34107
• 代理人: 尹婷婷;任晨晨

本發明涉及一種基于直接競爭熒光免疫法定量檢測葉酸功能化二氧化硅靶向納米藥物載體的方法，結合抗原、抗體反應的特異性與熒光的敏感性對SiO₂?FO納米粒子進行了定量檢測分析。步驟包括：制備SiO₂?FO包被抗原和免疫原，將免疫原注射到動物體內得到高特異性抗體，再將FITC標記上抗體制成熒光抗體，然后建立直接競爭熒光免疫法準確測定了SiO₂?FO的含量。本發明檢測方法操作簡單、靈敏度高、特異性強、可實現高通量檢測。

技術領域

本發明涉及納米材料的定量檢測，具體涉及一種基于直接競爭熒光免疫法定量檢測葉酸功能化二氧化硅(SiO₂-FO)靶向納米藥物載體的方法。

背景技術

本發明涉及納米材料的定量檢測，特別涉及一種基于直接競爭熒光免疫法定量檢測葉酸功能化二氧化硅(SiO₂-FO)靶向納米藥物載體的方法。

背景技術

癌癥是嚴重危害人類健康的疾病之一，癌癥治療對于提高患者的生存質量、減輕患者的痛苦、降低死亡率具有十分重要的意義。目前臨床中對于癌癥的治療主要采用化療法，但目前的化療藥物不具有靶向性，在殺死癌細胞的同時也會殺死正常細胞，從而引起嚴重的毒副作用，阻礙了化療藥物的發展和應用，對患者身心造成極大地損傷。因此，降低藥物毒副作用、改善藥物體內分布與代謝、提高藥物治療效率等已經成為生物醫學領域的研究熱點之一。

隨著納米材料的快速發展與應用，越來越多的研究者們將目光投向了納米藥物載體。納米載體粒徑大小在10～500nm，可將藥物分子包裹其中或吸附在其表面，通過靶向分子與細胞表面特異性受體結合或磁靶向，在細胞攝取作用下進入細胞內，實現安全有效的靶向藥物輸送，因此在藥物傳遞中具有特殊的價值和意義。

功能化納米材料在實現靶向性給藥、緩釋藥物、降低藥物的毒副作用等方面表現出良好的應用前景，已成為近年來新型藥物輸送系統研究的熱點。二氧化硅納米材料作為無機納米顆粒材料的重要成員之一，由于其制備簡便、性質穩定、生物相容性好和表面易修飾，在生物醫學領域發揮了重要作用。將靶向配體葉酸修飾到二氧化硅納米材料上作為一種新型靶向藥物載體，為癌癥的治療注入了新的活力，為改善抗腫瘤藥物載藥體系提供了新的思路與手段，在生物醫學領域發揮了重要作用。

納米生物技術是生物技術領域的前沿和熱點問題，從現有研究結果來看，對于納米材料應用于醫學領域通常局限于考察其在體內的分布、降解、藥物釋放效率以及毒性研究等方面。眾所周知，納米材料因其特殊的效應對人體可能有一定的影響，不同的劑量可能對機體產生不同的功效或副作用。因此，納米藥物載體的劑量檢測對于考察該材料是否可以應用于臨床顯得尤為重要。而目前對于納米材料的表征方法主要集中在其結構、成分、粒度、形貌以及界面等分析。而對于納米材料的定量分析還不是很多，目前常用的方法有電感耦合等離子體質譜法(ICP-MS)、高效液相色譜-電感耦合等離子體質譜法(HPLC-ICP-MS)以及氣相色譜-電感耦合等離子體質譜法(GC-ICP-MS)，然而這些方法不僅操作繁瑣，儀器昂貴，而且穩定性和靈敏度都不高，檢測技術仍不夠成熟。因此，對于納米載體本身在生物體內的定量檢測仍是一項十分必要且具有挑戰性的工作。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供一種基于直接競爭熒光免疫法定量檢測葉酸功能化二氧化硅(SiO₂-FO)靶向納米藥物載體的方法。結合抗原、抗體反應的特異性與熒光的敏感性對SiO₂-FO納米粒子進行了定量檢測分析。該方法具有操作簡單、靈敏度高、特異性強、可實現高通量檢測等特點。

本發明采取的技術方案為：

一種基于直接競爭熒光免疫法定量檢測葉酸功能化二氧化硅(SiO₂-FO)靶向納米藥物載體的方法，所述方法包括以下步驟：

a、SiO₂-FO包被抗原和免疫原的制備；