[發明專利]一種基于納米金標記的重金屬鎘可視化檢測方法

在審

• 申請號: 201710487107.7
• 申請日: 2017-06-23
• 公開（公告）號: CN107389942A
• 公開（公告）日: 2017-11-24
• 發明（設計）人: 王周平;趙旭;韋麗婷;吳世嘉;段諾;馬小媛
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/543
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于納米金標記的重金屬鎘可視化檢測方法，其特征在于：用檸檬酸鈉還原法制得納米金顆粒，顆粒粒徑15nm左右；隨后取巰基化鎘離子適配體和巰基化鎘離子適配體互補寡核苷酸單鏈分別與1mmol/L TCEP混合靜置30～40分鐘，再與納米金混合在35～40℃下搖床孵育10～15小時，其中所述的巰基化鎘離子適配體DNA1序列為5’SH-ACC GAC CGTGCT GGA CTC TGG ACT GTT GTG GTA TTA TTT TTG GTT GTG CAG TAT GAG CGA GCG TTGCG-3’，巰基化鎘離子適配體互補寡核苷酸單鏈DNA2序列為5’SH-CGC AAC GCT CGC TCATAC TGC ACA ACC AAA-3’；然后再將混合液在35～40℃下陳化10～15小時，并在這個過程中分多次加入NaCl，使NaCl的終濃度達到0.1mol/L；隨后將這兩種探針與待測物按一定比例混勻，所述的鎘離子適配體探針、鎘離子適配體互補寡核苷酸單鏈探針、待測溶液的體積比為1:2:1，然后將混合溶液混勻，95℃下加熱10min，然后放置于37℃環境中孵育50min，加入NaCl溶液至終濃度為0.1mol/L，反應5分鐘；靶標的加入會破壞DNA對金納米顆粒的保護作用，隨著靶標濃度的增大，納米金顆粒在高鹽環境下會發生聚集，溶液的顏色由紅色變為紫色或藍紫色，導致吸收峰變寬并紅移至620nm左右；觀察顏色變化并在400～800nm進行UV-vis掃描，根據A620/A520的比值和鎘離子濃度的對數值繪制出鎘離子濃度的標準曲線；隨后，實際檢測過程中通過測得最終檢測液的A620/A520的比值，根據標曲即可換算得到鎘離子濃度值。

2.如權利要求1所述的可視化檢測方法，其特征在于：制備納米金時，所采用的試劑為0.2～0.3％(w/v)氯金酸溶液與0.8～1.2％(w/v)的檸檬酸三鈉溶液，其中所述的檸檬酸三鈉溶液含有0.02～0.05％檸檬酸；制得納米金后，離心濃縮3～4倍待用。