[發明專利]一種銀杏的組織培養方法及生根培養基

有效

• 申請號: 201710483974.3
• 申請日: 2017-06-23
• 公開（公告）號: CN107047319B
• 公開（公告）日: 2019-03-22
• 發明（設計）人: 喻娜;向丹;崔帥;趙靜
• 申請（專利權）人: 廣安職業技術學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京弘權知識產權代理事務所(普通合伙) 11363
• 代理人: 逯長明;許偉群

1.一種銀杏的組織培養方法，其特征在于，包括：

制備MS培養基母液；所述MS培養基母液由大量元素母液、微量元素母液、鐵鹽母液以及有機物母液組成；

配制濃度為1g/L的6-芐氨基嘌呤溶液和濃度為1g/L萘乙酸溶液；

分別以銀杏樹枝和銀杏果殼為原料，制備得到銀杏樹枝活性炭和銀杏果殼活性炭；

以瓊脂、蔗糖、所述MS培養基母液、所述6-芐氨基嘌呤溶液和所述萘乙酸溶液，以及所述銀杏樹枝活性炭或所述銀杏果殼活性炭為原料，制備生根培養基；

取外植體，所述外植體為銀杏側芽帶葉莖尖；

對所述外植體進行消毒處理；

將消毒處理后的所述外植體接種到所述生根培養基中；

將接種后的所述生根培養基置于500lux-1000lux光照、20℃-25℃環境下培養。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述對外植體進行消毒處理的步驟包括：

將所述外植體置于洗衣粉水中浸泡1h-3.5h后，用流水沖洗5min-15min；

采用自來水，對流水沖洗后得到的外植體浸泡4-5次，每次5min；

將自來水浸泡后得到的外植體置于70％的乙醇溶液中浸泡0.75min-2min，并用無菌水沖洗3-4次，每次1min；

采用0.5％的新潔爾滅，對無菌水沖洗后得到的外植體處理8min-25min，并用無菌水沖洗3-4次，每次1min。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述以瓊脂、蔗糖、所述MS培養基母液、所述6-芐氨基嘌呤溶液和所述萘乙酸溶液，以及所述銀杏樹枝活性炭或所述銀杏果殼活性炭為原料，制備生根培養基的步驟包括：

分別量取50mL所述大量元素母液、5mL所述微量元素母液、5mL鐵鹽母液和5mL有機物母液，混合得到MS培養基母液；

分別稱取7g-8g瓊脂、0-15g蔗糖，以及2g-10g所述銀杏樹枝活性炭或2g-10g所述銀杏果殼活性炭，加入到所述MS培養基母液中，采用蒸餾水定容至1L；

向定容后的所述MS培養基母液中加入0.5mL-1.5mL所述6-芐氨基嘌呤溶液以及0.1mL-0.3mL所述萘乙酸溶液，加熱攪拌至所述瓊脂完全溶解，得到混合體；

將所述混合體的pH調節至5.2-5.8，分裝到培養瓶中；

將所述培養瓶置于121℃下滅菌30min，得到生根培養基。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述蔗糖的加入量為0g。

5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述銀杏樹枝活性炭加入量為6g，所述銀杏果殼活性炭的加入量為5g，所述6-芐氨基嘌呤溶液的加入量為1mL，所述萘乙酸溶液的加入量為0.15mL。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述大量元素母液的成分及濃度為：硝酸銨1650mg/L、硝酸鉀1900mg/L、磷酸二氫鉀170mg/L、七水合硫酸鎂370mg/L以及無水氯化鈣440mg/L。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述微量元素母液的成分及濃度為：碘化鉀0.83mg/L、硫酸錳22.3mg/L、硼酸6.2mg/L、硫酸鋅8.6mg/L、鉬酸鈉0.25mg/L、硫酸銅0.025mg/L以及氯化鈷0.025mg/L。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述鐵鹽母液的成分及濃度為：硫酸亞鐵27.8mg/L和乙二胺四乙酸二鈉37.3mg/L。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述有機物母液的成分及濃度為：肌醇100mg/L、煙酸0.5mg/L、鹽酸硫胺素0.1mg/L、鹽酸多吡醇0.5mg/L以及甘氨酸2mg/L。

10.一種用于銀杏組織培養的生根培養基，其特征在于，包括瓊脂、MS培養基母液、6-芐氨基嘌呤溶液和萘乙酸溶液，以及銀杏樹枝活性炭或銀杏果殼活性炭；

所述MS培養基母液由大量元素母液、微量元素母液、鐵鹽母液以及有機物母液組成；

所述銀杏樹枝活性炭由銀杏樹枝制備而成；

所述銀杏果殼活性炭由銀杏果殼制備而成。