[發(fā)明專利]喹諾酮類和磺胺類多殘留檢測抗原、抗體及其制備方法及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710483513.6
• 申請日: 2017-06-21
• 公開（公告）號: CN107449901B
• 公開（公告）日: 2020-03-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉輝;熊波;吳勝澤;趙丹霞;廖文彬;朱小鈿;吳偉峰;廖繼承;劉輝;韓振亞;陳磊;謝莊擎;陳啟鐫;梁祖培;蘇煥斌;邱國棟;羅永潮;葉為果;陳志波;楊錫倫;潘振朝
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N33/544
• 代理公司: 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 44102
• 代理人: 任重

1.一種喹諾酮類和磺胺類多殘留檢測抗原，其結(jié)構(gòu)式如式(I)所示：

所述載體蛋白為牛血清白蛋白。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述喹諾酮類和磺胺類多殘留檢測抗原的制備方法，其特征在于，是采用活潑酯法將喹諾酮類藥物與載體蛋白直接偶聯(lián)，然后將偶聯(lián)后的產(chǎn)物繼續(xù)通過活潑酯法與磺胺類半抗原進(jìn)行偶聯(lián)，制備獲得喹諾酮和磺胺類多殘留檢測抗原。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1.將喹諾酮藥物溶于DMF，形成混合溶液，然后加入EDC和NHS，于室溫下攪拌反應(yīng)，待反應(yīng)結(jié)束后，將上述反應(yīng)液加入到載體蛋白的磷酸鹽緩沖溶液中，繼續(xù)反應(yīng)，然后將反應(yīng)液于室溫下透析，制得喹諾酮類完全抗原；

S2.將磺胺類半抗原溶于DMF中，形成混合溶液，然后加入EDC和NHS，于室溫下攪拌反應(yīng)，得反應(yīng)液；

S3.將步驟S1制得的喹諾酮類完全抗原溶于DMF溶液中，然后加入步驟S2制備的反應(yīng)液，于室溫下反應(yīng)，待反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液進(jìn)行透析，即得到所述喹諾酮和磺胺類多殘留檢測抗原；

所述磺胺類半抗原具有式(II)所示分子結(jié)構(gòu)式：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述喹諾酮類藥物為環(huán)丙沙星、氧氟沙星或諾氟沙星。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，步驟S1所述喹諾酮類藥物與載體蛋白的質(zhì)量比為12∶1；步驟S1所述喹諾酮類藥物與EDC和NHS的反應(yīng)時(shí)間為8～24h；步驟S1所述喹諾酮類藥物與載體蛋白的反應(yīng)時(shí)間為6～24h；步驟S2反應(yīng)時(shí)間為8～12h；步驟S3所述磺胺類半抗原與喹諾酮類完全抗原的質(zhì)量比為10∶1；步驟S3反應(yīng)時(shí)間為6～8h；所述DMF、EDC和NHS的質(zhì)量比按照10∶2∶1確定。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述磺胺類半抗原的制備方法是：稱取對乙酰氨基苯磺酰氯置于圓底單口燒瓶中，用無水吡啶溶解后再加入4-氨基丁酸，回流反應(yīng)后蒸干溶劑，加水，用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相，將有機(jī)相蒸干后加入NaOH溶液攪拌過夜，次日用將溶液的pH值調(diào)為微酸性，將析出的固體過濾、洗滌、烘干后即得磺胺類半抗原。

7.權(quán)利要求1所述喹諾酮類和磺胺類多殘留檢測抗原或權(quán)利要求2至6任一項(xiàng)所述方法制備得到的喹諾酮類和磺胺類多殘留抗原在制備喹諾酮類和磺胺類多殘留抗體或檢測喹諾酮類和磺胺類農(nóng)藥殘留方面的應(yīng)用。

8.采用權(quán)利要求1所述喹諾酮類和磺胺類多殘留檢測抗原或權(quán)利要求2至6任一項(xiàng)所述方法制備得到的喹諾酮類和磺胺類多殘留抗原制備得到的喹諾酮類和磺胺類多殘留抗體。

9.權(quán)利要求8所述抗體在檢測喹諾酮類和磺胺類中的應(yīng)用。