[發明專利]一種提高植物直鏈淀粉含量的方法及應用

在審

• 申請號: 201710482844.8
• 申請日: 2017-06-22
• 公開（公告）號: CN107058328A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發明（設計）人: 張鵬;吳銀亮;周文智
• 申請（專利權）人: 江蘇三黍生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A01H5/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.提高植物直鏈淀粉含量和降低支鏈淀粉含量的方法及應用，其特征在于：它采用如下的方法步驟：

步驟一：利用CRISPR/Cas9多元系統編輯薯類植物SBEI或者SBEII基因；

步驟二：步驟一中所述的CRISPR/Cas9多元系統包括：系統中含有一個、兩個及兩個以上的sgRNA序列的CRISPR/Cas9系統；

步驟三：步驟二中的所述的CRISPR/Cas9多元系統的sgRNA核苷酸序列選自下組：

(a)如SEQ ID NO：1或者SEQ ID NO：3核苷酸序列中的核酸序列；

(b)將SEQ ID NO：1或者SEQ ID NO：3核苷酸序序列經過一個或多個核苷酸的取代、缺失或添加而形成的，且具有(a)核苷酸功能的由(a)衍生的核酸序列；

(c)或者與(a)限定的核酸序列有70％以上同源性且具有(a)核酸功能的由(a)衍生的多核酸序列；

步驟四：步驟一中所述的對SBEI或者SBEII基因的編輯包括如下方面：

(a)對SBEI或者SBEII基因所在基因組區域的編輯或對包含SBEI或者SBEII基因所在基因組區域的編輯；

(b)對(a)中所述編輯包括：單個或多個核酸位點的取代、缺失或添加；

步驟五：終止植物中SBEI或者SBEII多肽的表達或終止有生物功能的SBEI或者SBEII多肽的形成，從而提高薯類植物儲藏根中直鏈淀粉含量，降低支鏈淀粉的含量；以及調節薯類植物儲藏根重量、直徑或數目；

步驟六：從終止SBEI或者SBEII多肽的表達或終止有生物功能的SBEI或者SBEII多肽的形成后的植物中選擇出相較調節前植物而言性狀獲得變化的植物，包括：直接產生的較調節前而言性狀獲得變化的植物；雜交或者自交產生的有外源基因的相較調節前植物而言性狀獲得變化的植物；雜交或者自交產生的無外源基因的相較調節前植物而言性狀獲得變化的植物。

2.根據權利要求1所述的提高植物直鏈淀粉含量和降低支鏈淀粉含量的方法及應用，其特征在于：所述薯類植物包括：木薯，甘薯、馬鈴薯、山藥、芋頭、葛根、魔芋、洋姜或雪蓮果。

3.根據權利要求1所述的提高植物直鏈淀粉含量和降低支鏈淀粉含量的方法及應用，其特征在于：編輯所述SBEI或者SBEII核苷酸序列的sgRNA靶向SBEI或者SBEII基因組核苷酸序列；較佳地，靶向SBEI基因組的第1939-1958位和2948-2967位；或者SBEII基因組序列的1-20位和1193-1212位。