[發明專利]檢測小反芻獸疫病毒抗體的酶聯免疫試劑盒

有效

• 申請號: 201710480520.0
• 申請日: 2017-06-22
• 公開（公告）號: CN107238702B
• 公開（公告）日: 2019-02-01
• 發明（設計）人: 孫雨;宋曉暉;楊林;王傳彬;董浩;楊天意
• 申請（專利權）人: 中國動物疫病預防控制中心
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

本發明公開了檢測小反芻獸疫病毒抗體的酶聯免疫試劑盒。該檢測小反芻獸疫病毒抗體的酶聯免疫試劑盒，包括包被抗原，所述包被抗原為重組小反芻獸疫病毒H?F融合蛋白，所述重組小反芻獸疫病毒H?F融合蛋白為a)或b)的蛋白質：a)由SEQ ID No.2的氨基酸序列組成的蛋白質；b)將SEQ ID No.2所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的可溶性蛋白質。該檢測小反芻獸疫病毒抗體的酶聯免疫試劑盒不僅可用于小反芻獸疫的診斷,而且可評價疫苗免疫效果,此外,還可快速準確的檢測小反芻獸疫,有利于臨床上對小反芻獸疫的監測，從而為我國更好的控制小反芻獸疫的傳播將會產生積極作用。

技術領域

本發明涉及酶聯免疫檢測領域中檢測小反芻獸疫病毒抗體的酶聯免疫試劑盒。

背景技術

小反芻獸疫(PPR)是OIE法定報告的傳染病，也被我國政府列為一類動物傳染病,其具有高發病率和高死亡率的特點，該疫情的發生不但將給發生國的畜牧業生產帶來嚴重的經濟損失，還會對國際貿易產生嚴重的影響，因此該病引起許多國家的高度重視。小反芻獸疫(Peste des Petits Ruminants,PPR)是由小反芻獸疫病毒(Peste des PetitsRuminants Virus,PPRV)引起的一種急性、熱性、接觸性傳染病，具有高發病率和高死亡率的特點。疫病的控制和消滅，離不開有效的疫苗和快速敏感的檢測手段作為技術支撐，因此加大快速有效，價格低廉的診斷檢測試劑的研發力度，加快推動相關產品上市，能夠為我國的全國小反芻獸疫消滅計劃的實施提供有力的技術支撐。

目前,尚無有效方法治療小反芻獸疫,只能釆取疫苗接種,疫情發生后撲殺及加強定期血清監測的方法控制該病。國內外最常見的報道是以純化后的PPRV N、H蛋白(全長)或包含N蛋白主要抗原表位的部分重組N、H蛋白片段作為包被抗原,也有以濃縮的PPRV全病毒作為包被抗原建立間接ELISA方法檢測PPR血清抗體(邱文英,2011；Balamurugan et al.,2007),但尚未見到以H-F串聯融合蛋白為包被抗原建立間接ELISA方法的報道。

發明內容

本發明所要解決的一個技術問題是如何檢測小反芻獸疫病毒抗體。

為解決上述技術問題，本發明提供了檢測小反芻獸疫病毒抗體的酶聯免疫試劑盒。

本發明所提供的檢測小反芻獸疫病毒抗體的酶聯免疫試劑盒，包括包被原，所述包被原為重組小反芻獸疫病毒H-F融合蛋白，所述重組小反芻獸疫病毒H-F融合蛋白為a)或b)的蛋白質：

a)由SEQ ID No.2的氨基酸序列組成的蛋白質；

b)將SEQ ID No.2所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的可溶性蛋白質。

上述酶聯免疫試劑盒中，a)的蛋白質名稱為rmHF1-Y(又稱rmHF1)，是重組串聯的PPRV H-F蛋白。SEQ ID No.2由1184個氨基酸殘基組成。

上述酶聯免疫試劑盒中，所述重組小反芻獸疫病毒H-F融合蛋白可按照包括如下步驟的方法制備：使所述重組小反芻獸疫病毒H-F融合蛋白的編碼基因在生物中進行表達得到所述蛋白質；所述生物為微生物、植物或非人動物。

上述酶聯免疫試劑盒中，使所述重組小反芻獸疫病毒H-F融合蛋白的編碼基因在生物中進行表達包括將所述重組小反芻獸疫病毒H-F融合蛋白的編碼基因導入受體微生物，得到表達所述重組小反芻獸疫病毒H-F融合蛋白的重組微生物，培養所述重組微生物，表達得到所述重組小反芻獸疫病毒H-F融合蛋白。

上述酶聯免疫試劑盒中，所述受體微生物可為C1)-C4)中的任一種:

C1)原核微生物；

C2)革蘭氏陰性細菌；

C3)埃希氏菌屬細菌；