[發明專利]降解玉米赤霉烯酮的酵母菌株及其馴化培育方法

有效

• 申請號: 201710477472.X
• 申請日: 2017-06-22
• 公開（公告）號: CN107312722B
• 公開（公告）日: 2020-07-03
• 發明（設計）人: 王金榮;趙銀麗;李溪;蘇蘭利
• 申請（專利權）人: 河南工業大學
• 主分類號: C12N1/18
• 分類號: C12N1/18;C12N1/36;C12R1/865
• 代理公司: 鄭州德勤知識產權代理有限公司 41128
• 代理人: 宋建勛

本發明提供一種降解玉米赤霉烯酮的酵母菌株的馴化培育方法，是以安琪酵母菌為基礎菌種，將其接種于含不同玉米赤霉烯酮濃度的PDA培養液中進行逐級傳代培養；得到的新酵母菌株。該新酵母菌株已保藏，保藏編號為CGMCC No.13752。該新酵母菌株具有高度安全性，可應用于降解飼料原料及產品、谷物及其制品中的玉米赤霉烯酮毒素，并降解為無毒產物。該新酵母菌株傳代培養不退化，具有遺傳穩定性。同時，本發明所提供的酵母菌株馴化培育方法步驟簡單、易于操作。

技術領域

本發明屬于生物降解毒素的方法，尤其是涉及一種降解玉米赤霉烯酮的酵母菌株及其馴化培育方法。

背景技術

玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）是由多種鐮刀菌產生并釋放到環境中的真菌毒素，具有雌激素樣作用，主要表現為慢性毒性，包括對生殖系統的毒性以及基因毒性和內分泌系統的影響。動物采食被玉米赤霉烯酮污染的飼料容易導致動物繁殖周期紊亂，甚至造成繁殖障礙，影響動物生產發育中的機體，尤其是在胎兒及新生兒期，體內一些保護性屏障及代謝、排泄等生理功能尚未完善，對玉米赤霉烯酮更具有易感性。玉米赤霉烯酮在1～3mg/kg 時即能刺激雌激素受體轉錄，導致繁殖障礙。大多數動物對玉米赤霉烯酮都比較敏感，如豬、牛、綿羊、火雞和雞等。玉米赤霉烯酮可對雌性動物的生殖系統造成毒害，并通過胎盤的吸收從母體傳給胎兒，損害幼體的健康甚至造成流產。在畜禽中，豬尤其是后備母豬對玉米赤霉烯酮最為敏感，當飼料中含有1 mg/kg以上的玉米赤霉烯酮時就可以引起豬的雌性激素中毒。由于玉米赤霉烯酮是作物在田間生長期間由鐮刀霉菌產生的，對其預防很難有成效，必須采取有效的脫毒技術來消除玉米赤霉烯酮的污染。

目前控制玉米赤霉烯酮的方法主要包括物理方法、化學方法及生物方法。常用的控制玉米赤霉烯酮的物理方法有剔除、水洗、脫殼、碾磨、熱處理、壓煮、輻照和吸附劑吸附等。對于輕微污染玉米赤霉烯酮的谷物可以采取剔除、水洗、脫殼和碾磨等手段清除部分毒素，一般適用于少量谷物中玉米赤霉烯酮的清除。采用熱處理和壓煮方法對產生玉米赤霉烯酮的真菌起到殺菌作用，但是由于玉米赤霉烯酮的性質很穩定，所以這兩種方法對玉米赤霉烯酮的作用并不大，且高溫處理會破壞食品或飼料的營養價值。輻照技術處理真菌毒素不但能有效清除毒素，還能同時殺死鐮刀菌，但輻照降解后產物的組成、性質以及毒理等尚缺乏研究。吸附劑吸附也是一種能有效清除玉米赤霉烯酮污染的方法，但吸附方法在吸附毒素的同時也會吸附食物中的營養物質，并且由于毒素并未得到降解，會為環境帶來污染。常用的清除玉米赤霉烯酮的化學方法包括臭氧處理、雙氧水處理及碳酸鈉浸泡等，但是化學試劑的添加會引入許多不確定因素，生成新產物的潛在毒性也需進一步研究。

為了解決以上存在的問題，人們一直在尋求一種理想的技術解決方案。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種降解玉米赤霉烯酮的酵母菌株及其馴化培育方法，以解決上述問題。

為了實現上述目的，本發明所采用的技術方案是：一種降解玉米赤霉烯酮的酵母菌株，該酵母菌株為釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae ，保藏編號：CGMCC No. 13752，于2017年03月14日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心， 具體地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號。

本發明還提供一種降解玉米赤霉烯酮的酵母菌株的馴化培育方法，具體包括以下步驟：

（1）提供N份PDA液體培養基和一種安琪酵母種子液；分別向N份所述PDA液體培養基中添加玉米赤霉烯酮甲醇儲備液，制得N個不同玉米赤霉烯酮濃度的馴化培養基；

（2）以相同接種量將所述安琪酵母種子液分別接種到N個不同玉米赤霉烯酮濃度的所述馴化培養基中進行培養，得到N份一次誘導混合菌株液；分別檢測N份所述一次誘導混合菌株液中上清液的玉米赤霉烯酮濃度，選取玉米赤霉烯酮濃度降解率最大的一次誘導混合菌株液在PDA培養平板上進行劃線擴增培養，得到循環出發菌種；