[發明專利]一株用于脫色和絮凝的海洋細菌及其脫色絮凝劑制法

有效

• 申請號: 201710476290.0
• 申請日: 2017-06-21
• 公開（公告）號: CN107236688B
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發明（設計）人: 穆軍;崔霞;王玉霞;穆思源;陽廣鳳;馮麗娟
• 申請（專利權）人: 浙江海洋大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P19/04;C12R1/01
• 代理公司: 北京國翰知識產權代理事務所(普通合伙) 11696
• 代理人: 呂彩霞

1. 一株用于脫色和絮凝的海洋細菌，其特征在于：所述的海洋細菌保藏號為CGMCCNo. 12914。

2.根據權利要求1所述的一株用于脫色和絮凝的海洋細菌，其特征在于：所述的海洋細菌的篩選方法為：采集新鮮菲律賓蛤仔，放入無菌水中吐泥，取1ml泥，采用梯度稀釋倒平板分離和劃線純化，經活性測試篩選出具有高絮凝和脫色活性的菌株JP。

3.權利要求1或2所述的一株用于脫色和絮凝的海洋細菌的脫色絮凝劑制法，其特征在于：包括以下步驟：

1）種子液培養：將保藏號為CGMCC No. 12914的海洋細菌接種于斜面培養基，恒溫培養后，加入無菌水，振蕩制得種子液；

2）擴大發酵培養：在液體發酵培養基中接入種子液，恒溫搖床培養；所述液體發酵培養基為斜面培養基去除瓊脂；

3）胞外多糖提取：將發酵完成的菌液離心，取上清液，在上清液中加入乙醇，靜置后離心取沉淀，真空干燥得胞外多糖粗制品；

4）精制：在胞外多糖粗制品中加水，振蕩后加入乙醇，靜置后離心取沉淀，真空干燥得到海洋細菌脫色絮凝劑；

所述的斜面培養基成分及其濃度為：葡萄糖10-25g/L、尿素0.43-0.52g/L、硫酸銨0.18-0.24g/L、酵母膏0.4-0.6g/L、磷酸氫二鉀1.25-5 g/L、磷酸二氫鉀0.5-2g/L、瓊脂12-16g/L和余量陳化海水或人工海水；調節pH為7.2-7.4，115-121℃高壓滅菌20-30min，其中，所述人工海水配方為：氯化鈉25.0g/L、氯化鎂2.0g/L、硫酸鎂3.2g/L、氯化鈣1.2g/L、碳酸氫鈉0.2g/L、氯化鉀0.7g/L、溴化鈉0.06g/L、硼酸0.06g/L、硅酸鈉0.0024g/L、磷酸0.002g/L、六氯化二鋁0.013g/L、氨水0.002g/L、硝酸鋰0.0013g/L、蒸餾水余量。

4.根據權利要求3所述的一株用于脫色和絮凝的海洋細菌的脫色絮凝劑制法，其特征在于：所述的步驟1中培養溫度為22-27℃，培養時間為24-72h，培養基與無菌水體積比為1:0.7-1.3。

5.根據權利要求3所述的一株用于脫色和絮凝的海洋細菌的脫色絮凝劑制法，其特征在于：所述的步驟2中每100ml液體發酵培養基接入0.2-0.5ml種子液，發酵溫度為22-27℃，搖床速率為120-140r/min，發酵培養時間為3-4d。

6.根據權利要求3所述的一株用于脫色和絮凝的海洋細菌的脫色絮凝劑制法，其特征在于：所述的步驟3中乙醇體積為上清液體積的3-6倍，在2-5℃下靜置10-18h。

7.根據權利要求3所述的一株用于脫色和絮凝的海洋細菌的脫色絮凝劑制法，其特征在于：所述的步驟4中粗制品體積為水的1-2倍，乙醇體積為水溶液體積的3-6倍，乙醇溫度為2-5℃。