[發(fā)明專利]用于通過利用所有可用片段改進(jìn)分段反應(yīng)單元的裝載容量的系統(tǒng)和方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710469710.2
• 申請日: 2017-06-20
• 公開（公告）號: CN107525845B
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: V·扎布勞斯克夫;C·穆勒
• 申請（專利權(quán)）人: 薩默費(fèi)尼根有限公司
• 主分類號: G01N27/62
• 分類號: G01N27/62;H01J49/00
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 江磊;朱黎明

一種用于分析樣本的方法包含在多片段反應(yīng)單元的第一片段中捕獲第一離子包；在所述多片段反應(yīng)單元的第二片段中捕獲第二離子包；和在所述多片段反應(yīng)單元的第三片段中捕獲第三離子包。所述第一、第二和第三離子包中的至少一個包含前驅(qū)體離子，且所述第一、第二和第三離子包中的至少另一個包含試劑離子。所述方法進(jìn)一步包含混合所述反應(yīng)單元內(nèi)的所述第一、第二和第三離子包以引起所述前驅(qū)體離子與所述試劑離子之間的反應(yīng)以形成產(chǎn)物離子。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明大體上涉及包含用于通過利用所有可用片段改進(jìn)分段反應(yīng)單元的裝載容量的系統(tǒng)和方法的質(zhì)譜學(xué)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

氣相離子/離子反應(yīng)已經(jīng)論證為用于在生物分析中通過特定設(shè)施探測及操控分析物離子的靈活方式。舉例來說，用以對分析物離子進(jìn)行碎裂的分析物離子與反應(yīng)物離子之間的反應(yīng)可經(jīng)由觀測碎裂質(zhì)荷比及碎裂操作模式提供結(jié)構(gòu)信息。本領(lǐng)域中已知用于離子-離子反應(yīng)的各種技術(shù)，例如電子轉(zhuǎn)移解離(ETD)、負(fù)電子轉(zhuǎn)移解離(nETD)、質(zhì)子轉(zhuǎn)移反應(yīng)(PTR)。

ETD及nETD為在質(zhì)譜儀中對離子進(jìn)行碎裂的方法。類似于電子捕獲解離，ETD通過轉(zhuǎn)移來自反應(yīng)物的電子而誘發(fā)前驅(qū)體陽離子的碎裂操作。ETD使用自由基陰離子，例如蒽、熒蒽或偶氮苯，而非利用自由電子。類似地，nETD通過將來自前驅(qū)體陰離子的電子轉(zhuǎn)移到自由基陽離子反應(yīng)物而誘發(fā)碎裂操作。ETD及nETD對于更高電荷狀態(tài)離子(z2)均可作用良好，然而，相對于碰撞誘發(fā)解離(CID)，ETD對于更長肽或甚至完整蛋白質(zhì)的碎裂操作為有利的。

ETD可適用于肽或蛋白質(zhì)的識別。ETD沿著肽骨架隨機(jī)分解。此主要產(chǎn)生補(bǔ)充由CID產(chǎn)生的b及y類型離子的c及z類型碎裂離子，從而提高序列覆蓋度及蛋白質(zhì)識別。當(dāng)ETD分解肽骨架時，側(cè)鏈及例如磷酸化的修飾完整保留，從而使得ETD尤其適用于識別修飾位點(diǎn)。此使得技術(shù)對于從上到下的蛋白質(zhì)組研究至關(guān)重要。

具有相反極性的前驅(qū)體物質(zhì)與試劑物質(zhì)可通過使陽離子及陰離子兩者保持在離子阱或其它裝置中而反應(yīng)。如同任何化學(xué)反應(yīng)，動力學(xué)取決于陽離子及陰離子的濃度。此外，碎裂操作的程度取決于陽離子及陰離子的相對豐度以及反應(yīng)容器內(nèi)耗費(fèi)的時間長度。因此，為了達(dá)成前驅(qū)體的碎裂操作的所要程度，控制前驅(qū)體的量、反應(yīng)物的量及試劑離子可與前驅(qū)體離子及所得碎裂離子反應(yīng)的時間長度為有利的。

從前文，應(yīng)了解，存在對于用于將前驅(qū)體離子及反應(yīng)物離子裝載在多段式反應(yīng)單元中的改進(jìn)系統(tǒng)和方法的需要。

發(fā)明內(nèi)容

在第一方面中，用于分析樣本的方法可包含在多片段反應(yīng)單元的第一片段中捕獲第一離子包；在所述多片段反應(yīng)單元的第二片段中捕獲第二離子包；以及在所述多片段反應(yīng)單元的第三片段中捕獲第三離子包。所述第一、第二和第三離子包中的至少一個包含前驅(qū)體離子，且所述第一、第二和第三離子包中的至少另一個包含試劑離子。所述方法可進(jìn)一步包含混合反應(yīng)單元內(nèi)的第一、第二和第三離子包以引起前驅(qū)體離子與試劑離子之間的反應(yīng)從而形成產(chǎn)物離子。

在第一方面的各種實(shí)施例中，所述多片段反應(yīng)單元為分段線性離子阱、較高能量解離(HCD)單元、多用途解離單元或其任何組合。

在第一方面的各種實(shí)施例中，所述方法可進(jìn)一步包含將樣本供應(yīng)到離子源及產(chǎn)生前驅(qū)體離子。

在第一方面的各種實(shí)施例中，所述方法可進(jìn)一步包含將試劑供應(yīng)到離子源及產(chǎn)生試劑離子。

在第一方面的各種實(shí)施例中，所述方法可進(jìn)一步包含將產(chǎn)物離子引導(dǎo)到質(zhì)量分析器以確定產(chǎn)物離子的質(zhì)荷比。在特定實(shí)施例中，所述方法可進(jìn)一步包含基于產(chǎn)物離子的質(zhì)荷比識別所述樣本的組分。

在第一方面的各種實(shí)施例中，第一和第三片段可為多片段反應(yīng)單元的外部片段及第二片段可為多片段反應(yīng)單元的中心片段。

在第一方面的各種實(shí)施例中，第一和第三離子包可包含試劑離子及第二離子包可包含前驅(qū)體離子。