[發(fā)明專利]用于細(xì)菌的多順反子表達(dá)系統(tǒng)

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710467009.7
• 申請日: 2012-06-01
• 公開（公告）號: CN107267546B
• 公開（公告）日: 2021-08-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 克拉斯·萬登布魯克;卡羅利安·萬于伊內(nèi)蓋姆;洛塔爾·施泰德勒
• 申請（專利權(quán)）人: 英特瑞克斯頓阿克圖比奧帝克斯有限公司
• 主分類號: C12N15/74
• 分類號: C12N15/74
• 代理公司: 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 鄭斌;尹玉峰

1.包含多順反子表達(dá)單元的重組核酸，所述多順反子表達(dá)單元以5’至3’順序包含：

（a）對乳酸菌而言內(nèi)源的啟動子，其中所述啟動子是eno啟動子（Peno）、usp45啟動子（Pusp45）、gapB啟動子（PgapB）、pyk啟動子（Ppyk）、rpmB啟動子（PrpmB）或rplS啟動子（PrplS）；

（b）對所述乳酸菌而言內(nèi)源的基因，即內(nèi)源基因，其中所述啟動子是所述內(nèi)源基因的天然啟動子；以及

（c）位于所述內(nèi)源基因3’末端的一個或更多個對所述乳酸菌而言外源的基因，即外源基因；

其中所述內(nèi)源基因與所述一個或更多個外源基因通過對所述乳酸菌而言內(nèi)源的至少一個基因間區(qū)域轉(zhuǎn)錄偶聯(lián)，并且所述至少一種基因間區(qū)域包含（i）rplW、rplP、rpmD、rplB、rpsG、rpsE、rplN、rplM、rplE或rplF的起始密碼子與（ii）其5’毗連基因的終止密碼子之間的核苷酸序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組核酸，其中所述基因間區(qū)域是rpmD之前的基因間區(qū)域。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的重組核酸，其中所述基因間區(qū)域包含SEQ ID NO:3的序列。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的重組核酸，其中所述乳酸菌是乳球菌（Lactococcus）、乳桿菌（Lactobacillus）或腸球菌（Enterococcus）。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的重組核酸，其中所述乳酸菌是乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的重組核酸，其中所述一個或更多個外源基因編碼一個或更多個多肽。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的重組核酸，其中所述一個或更多個外源基因與編碼分泌信號的核酸序列翻譯偶聯(lián)。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的重組核酸，其中所述分泌信號是乳球菌Usp45分泌信號。

9.根據(jù)權(quán)利要求6至8中任一項(xiàng)所述的重組核酸，其中所述一個或更多個多肽在對象中具有治療性或預(yù)防性作用。

10.根據(jù)權(quán)利要求6至9中任一項(xiàng)所述的重組核酸，其中所述一個或更多個多肽是：

（a）白細(xì)胞介素10（IL-10）；

（b）三葉因子1（TFF1）；

（c）胰島素原（ins）；或

（d）白細(xì)胞介素27（IL-27）。