[發明專利]一種組織病理學的組織樣本的處理方法

在審

• 申請號: 201710463604.3
• 申請日: 2017-06-19
• 公開（公告）號: CN107271233A
• 公開（公告）日: 2017-10-20
• 發明（設計）人: 陳奎生;孫淼淼;姜國忠;趙志華;楊建萍;呂新全;韋娜;張紅新;鄭湘予;高冬玲
• 申請（專利權）人: 鄭州大學第一附屬醫院
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙)61223
• 代理人: 俞曉明

1.一種組織病理學的組織樣本的處理方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1，對離體的組織樣本進行固定、沖洗、脫水、透明、浸蠟包埋、切片操作，得到石蠟組織切片；

步驟2，染色

步驟2.1，采用脫蠟液對石蠟組織切片浸泡脫蠟10min，得到脫蠟切片；其中，脫蠟液由以下重量份的組分混合后制成：D-檸檬烯58-60份、甲基環己烷40-42份；

步驟2.2，依次用復水液A、復水液B、復水液C、復水液D、復水液E浸泡處理，然后用復水液F沖洗處理3min，得到復水切片；

其中，復水液A由二甲苯和無水乙醇按照1:1的體積比例混合而成，復水液A浸泡時間為5min；復水液B、復水液C、復水液D、復水液E依次是體積分數95％乙醇、70％乙醇、45％乙醇、30％乙醇，且復水液B、復水液C、復水液D、復水液E的溶劑均為0.01mol/L的檸檬酸鈉溶液；復水液B-復水液E的浸泡時間均為3min；復水液F是ddH₂O；

步驟2.3，依次用染色液A浸泡復水切片3-5min，水沖洗15-20s，鹽酸-乙醇溶液沖洗1-2s，水沖洗2-3s，飽和碳酸鋰溶液沖洗15-20s，水沖洗直至切片變色，染色液B浸泡3-5min，水沖洗2-3s，復水液D沖洗5-10s、復水液C沖洗5-10s、復水液B沖洗5-10s，無水乙醇脫水，二甲苯透明，得到透明切片；

所述染色液A由以下重量份的組分混合而成：蘇木精1份、硫酸鋁鉀15份、無水乙醇10份、氯化汞0.5份、氯化鈉0.5-0.9份、去離子水200份；使用時每100ml染色液A加入5ml冰醋酸；

所述染色液B是將1g伊紅溶解入100ml 95％乙醇中制備而成，使用時每100ml染色液A加入50μL冰醋酸；

步驟3，采用中性樹脂對染色切片進行封片，完成對組織樣本的處理。

2.根據權利要求1所述的組織病理學的組織樣本的處理方法，其特征在于，所述脫蠟液由以下重量份的組分混合后制成：D-檸檬烯58份、甲基環己烷42份。

3.根據權利要1所述的組織病理學的組織樣本的處理方法，其特征在于，所述鹽酸-乙醇溶液由0.5mL鹽酸和99mL 75％酒精混合而成。

4.根據權利要求1所述的組織病理學的組織樣本的處理方法，其特征在于，所述染色液A由以下重量份的組分混合而成：蘇木精1份、硫酸鋁鉀15份、無水乙醇10份、氯化汞0.5份、氯化鈉0.5份、去離子水200份。

5.根據權利要求1所述的組織病理學的組織樣本的處理方法，其特征在于，所述染色液A按以下方法制備：先用去離子水加熱溶解硫酸鋁鉀、氯化鈉，得硫酸鋁鉀溶液，用無水乙醇溶解蘇木精，得蘇木精溶液；然后將硫酸鋁鉀溶液和蘇木精溶液混合，煮沸1min，冷卻20-30s，加入氯化汞，加熱攪拌直至顏色變為紫紅色，濾紙過濾后，每100ml染色液A加入5ml冰醋酸，備用。