[發(fā)明專利]一種丹參地上莖葉部分綜合利用的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710462837.1
• 申請日: 2017-06-19
• 公開（公告）號: CN107174598B
• 公開（公告）日: 2020-09-04
• 發(fā)明（設計）人: 李艷玲
• 申請（專利權）人: 山東第一醫(yī)科大學（山東省醫(yī)學科學院）
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;A61K36/537;C12R1/645;A61K135/00;A61K127/00
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 呂薇

1.一種對丹參地上莖葉部分進行有效成分提取制備的方法，其特征是，包括以下步驟：

(1)丹參地上莖葉中總丹參酮、總酚酸和多糖的聯合提取：

1)總丹參酮的提取：

將丹參地上莖葉進行粉碎，然后采用乙醇溶液進行超聲波提取，提取后固液分離，得到藥渣1和含有總丹參酮的提取液；

其中，提取的工藝參數為：乙醇溶液的體積分數為85～89％，液料比為40～42：1，提取溫度為48～52℃；

2)總酚酸的提取：

將藥渣1采用乙醇溶液進行超聲波提取，提取后固液分離，得到藥渣2和含有總酚酸的提取液；

其中，提取的工藝參數為：乙醇溶液的體積分數為40～45％，液料比為20～25：1，提取溫度為40～45℃；

3)多糖的提取：

將藥渣2采用乙醇溶液進行超聲波提取，提取后固液分離，得到藥渣3和含有多糖的提取液；

(2)白黃小脆柄菇菌種活化、液體發(fā)酵種子液制備：

將白黃小脆柄菇接種于固體馬鈴薯綜合培養(yǎng)基上進行活化，然后接種到液體培養(yǎng)基上，震蕩培養(yǎng)后作為種子液；

(3)白黃小脆柄菇固態(tài)發(fā)酵藥渣3產纖維素酶：

將藥渣3過篩，加水，浸泡設定時間，滅菌冷卻，制成固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基；然后接種白黃小脆柄菇種子液后進行培養(yǎng)，用來提取纖維素酶；

(4)纖維素酶粗酶液的制備：

固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)結束后，將發(fā)酵培養(yǎng)物干燥、粉碎過篩，然后加入乙酸-乙酸鈉緩沖液，在恒溫35～40℃下提取1～1.5h，提取后的提取液經離心，得到上清液，即為粗酶液。

2.如權利要求1所述的方法，其特征是：步驟(1)中，三種物質的超聲波提取的功率為220～250W，提取時間為30～40min。

3.如權利要求1所述的方法，其特征是：步驟(1)中，所述超聲波提取的功率為250W，提取時間為40min。

4.如權利要求1所述的方法，其特征是：步驟(1)中，對于總丹參酮的提取，提取的工藝參數為：乙醇溶液的體積分數為88％，液料比為40.8：1，提取溫度為50℃。

5.如權利要求1所述的方法，其特征是：步驟(1)中，對于總酚酸的提取，提取的工藝參數為：乙醇溶液的體積分數為41.2％，液料比為20.2：1，提取溫度為40.6℃。

6.如權利要求1所述的方法，其特征是：步驟(1)中，對于多糖的提取，提取的工藝參數為：乙醇溶液的體積分數為11.44％，液料比為43.2：1，提取溫度為42.3℃。

7.如權利要求1所述的方法，其特征是：步驟(1)中，總丹參酮的提取采用響應面法設定提取的變量參數，所述響應面法設定提取的變量參數通過以下二次回歸方程模型：Y＝0.71-0.014A+0.00625B-0.0025C+0.000AB-0.0075AC+0.013BC-0.039A2-0.039B2-0.047C2；

總酚酸的提取采用響應面法設定提取的變量參數，所述響應面法設定提取的變量參數通過以下二次回歸方程模型：

Y＝3.62+0.10A+0.018B+0.064C-0.053AB-0.090AC+0.042BC-0.41A2-0.38B2-0.42C2；

多糖的提取采用響應面法設定提取的變量參數，所述響應面法設定提取的變量參數通過以下二次回歸方程模型：

Y＝2.98+0.046A+0.14B+0.079C-0.025AB+0.14AC+0.000BC-0.24A²-0.21B²-0.21C²；

其中，Y為相應物質的提取率，A為乙醇溶液的體積分數，B為液料比，C為溫度。

8.如權利要求1所述的方法，其特征是：步驟(2)中，活化時間為6～7天；震蕩培養(yǎng)的時間為3～5天。