[發明專利]一種穩定的β2微球蛋白溶液、其制備方法及應用

有效

• 申請號: 201710462346.7
• 申請日: 2017-06-19
• 公開（公告）號: CN107290545B
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發明（設計）人: 王新剛;劉心田;于穎穎;劉秀萌
• 申請（專利權）人: 威海威仕泰醫療科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/531
• 代理公司: 威海科星專利事務所 37202
• 代理人: 丁宏斌

本發明公開了一種穩定的β2微球蛋白溶液、其制備方法及應用，穩定的β2微球蛋白溶液包括檢測用濃度水平的β2微球蛋白、Good’s緩沖液、氯化鈉、甘油、牛血清白蛋白、穩定劑、防腐劑和蛋白酶抑制劑，所述Good’s緩沖液pH值為7.5至9.0，所述氯化鈉濃度20～250mmol/L。本發明的β2微球蛋白溶液可應用于校準品和質控品，結合體外診斷試劑盒準確測定人體組織中β2微球蛋白的含量。其在4℃的有效期超過1年，開瓶穩定性超過1個月，結果準確，重復性好，開瓶即用，操作方便。

技術領域

本發明涉及醫學檢測技術領域，特別涉及一種穩定的β2微球蛋白溶液、其制備方法及應用。

背景技術

β2微球蛋白(β2-microglobulin，簡稱β2-MG)是由瑞典科學家 Berggard1968年首次從尿中分離純化出來，分子量11800，等電點5.7，因電泳在β2區帶而得名。β2-MG是一種小分子球狀結構蛋白，存在于有核細胞的表面，與MHCI和CD1等蛋白質復合物結合在一起，對于蛋白質的運輸和免疫反應的識別具有重要的作用。β2-MG可從細胞中排出以單體的形式存在于血液和尿液中，通常以較低的濃度水平存在。糖尿病患者或者高血壓患者常常出現腎臟損傷的并發癥，腎臟回收和代謝功能下降，血液和尿液中β2-MG會出現異常上升。因此，糖尿病和高血壓患者血液和尿液中的β2-MG含量的上升經常預示著早期腎臟功能的損傷。血液中β2-MG的水平升高也可能是病毒性感染、骨髓瘤、骨髓增生等疾病導致。臨床上檢測血液或尿中的β2-MG濃度為臨床腎功能測定、腎移植成活、糖尿病腎病、重金屬鎘、汞中毒以及某些惡性腫瘤的臨床診斷提供早期、可靠和靈敏的指標。腦脊液中β2-MG的檢測對腦膜白血病的診斷也有特別的意義。

目前，β2-MG含量的測定主要采用免疫比濁法或膠乳增強免疫比濁法，試劑通常為液體雙試劑，在醫院即開即用。而β2-MG的校準品常常為凍干粉，需要添加生理鹽水現配現用。醫院檢驗科為非潔凈環境，配制試劑容易引入污染，造成蛋白質降解。而且，校準品溶解后，需要進行梯度稀釋制備至少6個濃度水平的溶液，用于多點定標。校準品經生理鹽水多次稀釋后穩定性很差，無法長期存放，下次定標時需重新進行配制，費時費力，且價格昂貴、浪費嚴重。

發明內容

本發明的目的是克服上述技術缺陷，提供一種穩定的β2微球蛋白溶液，該溶液應用于校準品的制備可長期存放，多次使用，提高臨床β2-MG含量的測定的效率，降低檢測成本。

本發明一種穩定的β2微球蛋白溶液，包括檢測用濃度水平的β2微球蛋白、 Good’s緩沖液、氯化鈉、甘油、牛血清白蛋白、穩定劑、防腐劑和蛋白酶抑制劑，所述Good’s緩沖液pH值為7.5至9.0，所述氯化鈉濃度20～250mmol/L。作為一種優選方式，Good’s緩沖液為三羥甲基甲胺基丙磺酸(TAPS)或者4- 羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)。

作為一種優選方式，所述甘油的體積百分比濃度為5％～25％。

作為一種優選方式，牛血清白蛋白的濃度為0.5～5g/L。

作為一種優選方式，所述穩定劑為濃度范圍5～250mmol/L天冬氨酸鎂、5～250mmol/L甘氨酸、5～250mmol/L丙氨酸中的一種或一種以上。

作為一種優選方式，防腐劑為質量百分比濃度為0.05％～0.2％的疊氮鈉，或者Proclin300。

作為一種優選方式，蛋白酶抑制劑為濃度為0.5～2mmol/L的苯甲基磺酰氟 PMSF、濃度為0.5～5mmol/L的EDTA中的一種或兩種。

作為一種優選方式，上述β2微球蛋白溶液中還含有表面活性劑，所述表面活性劑為終濃度為0.1～5mmol/L的膽酸鈉,或0.5-2％的脂肪醇聚氧乙烯醚 AEO7。

作為一種優選方式，上述β2微球蛋白溶液中還含有賦形劑，所述賦形劑為濃度為0.1～10g/L聚乙二醇PEG6000。