[發明專利]用于制造發酵產物的方法

在審

• 申請號: 201710458195.8
• 申請日: 2012-11-30
• 公開（公告）號: CN107267558A
• 公開（公告）日: 2017-10-20
• 發明（設計）人: R·戴因哈默;J·克雷格;松井知子;高木忍;S·克拉克;J·馬修斯;A·G·尤爾曼德;C-L·宋
• 申請（專利權）人: 諾維信公司;諾維信北美公司
• 主分類號: C12P7/06
• 分類號: C12P7/06;C12P1/02;C12N9/28;C12N9/52;C12R1/865
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司11322
• 代理人: 龍淳,顧小曼

1.一種由含有淀粉的材料制造發酵產物的方法，其包括以下步驟：

i)在5.0-7.0的pH范圍下在高于初始凝膠化溫度的溫度下使用以下物質使所述含有淀粉的材料液化：

-與SEQ ID NO:1有至少80％的序列同一性的α-淀粉酶；

-與SEQ ID NO:13具有至少80％的同一性并且在80℃/70℃下測定為相對活性的熱穩定性值大于20％的蛋白酶；和

ii)使用產生碳水化合物源的酶進行糖化；

iii)使用發酵有機體進行發酵。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述α-淀粉酶為本文SEQ ID NO:1所示的嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillus stearothermophilus)α-淀粉酶。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中所述α-淀粉酶在pH 4.5、85℃、0.12mM CaCl₂的條件下的T1/2(分鐘)為至少10。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的方法，其中所述蛋白酶在80℃/70℃下測定為相對活性的熱穩定性大于25％。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的方法，其中所述蛋白酶源自強烈熾熱球菌(Pyrococcus furiosus)菌株。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的方法，其中在液化步驟i)過程中存在和/或加入在85℃、pH 5.3的條件下熱穩定性為至少20％的葡糖淀粉酶。

7.根據權利要求1-6中任一項所述的方法，其中在液化和/或糖化過程中存在有支鏈淀粉酶。

8.一種酶組合物，其包括：

i)與SEQ ID NO:1有至少80％的序列同一性的α-淀粉酶；

ii)與SEQ ID NO:13具有至少80％的同一性并且在80℃/70℃下測定為相對活性的熱穩定性值大于20％的蛋白酶。

9.根據權利要求8所述的組合物，其中所述α-淀粉酶為本文SEQ ID NO:1所示的嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillus stearothermophilus)α-淀粉酶。

10.根據權利要求8或9所述的組合物，其中所述α-淀粉酶在pH4.5、85℃、0.12mM CaCl₂的條件下的T1/2(分鐘)為至少10。

11.根據權利要求8-10中任一項所述的組合物，其中所述蛋白酶在80℃/70℃下測定為相對活性的熱穩定性大于25％。

12.根據權利要求8-11中任一項所述的組合物，其中所述蛋白酶源自強烈熾熱球菌(Pyrococcus furiosus)菌株。

13.根據權利要求8-12中任一項所述的組合物，其還包括葡糖淀粉酶。

14.根據權利要求13所述的組合物，其中所述葡糖淀粉酶在85℃、pH 5.3的條件下熱穩定性為至少20％。

15.根據權利要求8-14中任一項所述的組合物，其還包括支鏈淀粉酶。