[發明專利]一種抗斑點叉尾鮰病毒核衣殼蛋白的單克隆抗體及其應用

有效

• 申請號: 201710457030.9
• 申請日: 2017-06-16
• 公開（公告）號: CN107337730B
• 公開（公告）日: 2020-03-10
• 發明（設計）人: 景宏麗;吳紹強;林祥梅;高隆英;張旻;王娜
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: C07K16/08
• 分類號: C07K16/08;C12N5/20;G01N33/532;G01N33/543;G01N33/569;G01N33/577
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 趙曉丹

本發明公開一種抗斑點叉尾鮰病毒核衣殼蛋白的單克隆抗體，該單克隆抗體是由保藏編號為CGMCC No.13843的小鼠雜交瘤細胞株分泌產生。本發明還公開了一種檢測斑點叉尾鮰病毒的膠體金試紙條。本發明進一步公開了上述單克隆抗體、雜交瘤細胞株和膠體金試紙條的應用。本發明抗斑點叉尾鮰病毒核衣殼蛋白的單克隆抗體特異性強，能準確的檢測出斑點叉尾鮰病毒，為預防和診斷斑點叉尾鮰病毒病提供了有利的條件。

技術領域

本發明涉及免疫學領域，更具體地，涉及一種抗斑點叉尾鮰病毒核蛋白的單克隆抗體，雜交瘤細胞株及其建立一種檢測斑點叉尾鮰病毒的膠體金試紙條。

背景技術

斑點叉尾鮰(Ictalurus punctatus)也被稱為溝鯰，屬于鲇形目、鮰科。其具有生長速度比較快、肉質細嫩、銷售價格較高的特點，受到了廣大消費者和水產養殖業者的歡迎。隨著其養殖規模的逐步擴大，由于病毒感染引起的斑點叉尾鮰病毒病(Channelcatfish virus disease，CCVD)的日益流行，給其養殖業造成了巨大的經濟損失。

斑點叉尾鮰病毒病(CCVD)最早流行于北美。爆發流行的最適水溫為25-30℃。該病是由皰疹病毒(即斑點叉尾鮰病毒(Channel catfish virus)，簡稱CCV)引起的疾病，該病毒導致斑點叉尾鮰幼魚群爆發急性傳染病，并導致很高的死亡率。其中剛孵化的魚苗其死亡率達100％。

CCV是鮰魚皰疹病毒I型(Ictalurid herpesvirus I)，常稱為斑點叉尾鮰病毒(Channel catfish virus,CCV)，國際病毒分類委員會(ICTV)第八次報告的最新病毒分類系統將其歸類為皰疹病毒科(Herpesvirus)的鮰皰疹病毒屬(Ictalurivirus)。它是Fijan于1968年發現的一種線性雙鏈DNA病毒。其也是魚類中最早發現皰疹病毒。病毒顆粒為20面體對稱，由囊膜、間層和核衣殼組成，核衣殼由162個殼粒組成，具有囊膜的完整病毒粒子直徑約為175nm。CCV的基因組大小約為134kb.整個基因組預測由76個開放閱讀框(Openreading frame，ORF)組成。其中，囊膜蛋白有ORF10、ORF46和ORF59；核衣殼蛋白有ORF27、ORF28、ORF39和ORF53等；間層蛋白有ORFl l、ORFl2和ORF65等。每種結構蛋白在斑點叉尾鮰病毒擴增、感染過程中都起到重要作用，研究其對后期病毒感染機理以及疫苗都具有重要作用。

目前國內外檢測這種病毒的方法主要有中和試驗、斑點雜交檢測技術、PCR技術、實時定量熒光探針PCR技術、免疫熒光技術等。這些方法雖然準確可靠，但因具有操作繁瑣、檢測周期長等缺點，不能滿足快速確診病原、及時控制疫情的實際工作需求，因此，建立更靈敏快捷的檢測技術對該病的防治具有重要的現實意義。

發明內容

本發明的第一個目的在于提供一種抗斑點叉尾鮰病毒核衣殼蛋白的單克隆抗體及其分泌產生該單克隆抗體的雜交瘤細胞株。

本發明的第二個目的在于提供一種檢測斑點叉尾鮰病毒的膠體金試紙條。

本發明的第三個目的在于上述單克隆抗體、雜交瘤細胞株和膠體金試紙條制備檢測斑點叉尾鮰病毒的試劑或試劑盒中應用。

為達到上述目的，本發明采用下述技術方案：

本發明抗斑點叉尾鮰病毒核衣殼蛋白的單克隆抗體，是由保藏編號為CGMCCNo.13843的小鼠雜交瘤細胞株CCV-8B6分泌產生。該小鼠雜交瘤細胞株CCV-8B6已于2017年5月12日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址是中國北京市朝陽區北辰西路1號院3號)，其保藏編號為CGMCC No.13843，分類命名為雜交瘤細胞株。

保藏編號為CGMCC No.13843的小鼠雜交瘤細胞株也屬于本發明的保護范圍。