[發明專利]一種用于檢測葡萄球菌磺胺類藥物耐藥基因的分子標記及其應用

在審

• 申請號: 201710456938.8
• 申請日: 2017-06-16
• 公開（公告）號: CN107236800A
• 公開（公告）日: 2017-10-10
• 發明（設計）人: 呂少波;李蘇楊;李卓才
• 申請（專利權）人: 蘇州喬納森新材料科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/14;C12R1/44
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司32200
• 代理人: 樓高潮

技術領域

本發明屬于分子生物學領域，涉及一種采用分子生物學手段檢測微生物耐藥基因的方法，具體為一種用于檢測葡萄球菌磺胺類藥物耐藥基因的分子標記及其應用。

背景技術

隨著動物養殖業向規模化、集約化方向發展，飼養密度提高，應激因素增多，為疾病的流行提供了有利條件，導致動物細菌性疾病的危害加重。國內外大量資料表明，多年來由于臨床抗生素廣泛及不合理的使用，給細菌帶來了選擇壓力，其最終結果是選擇性保留了耐藥能力強的致病菌，給感染性疾病的治療帶來了嚴重的危機。細菌耐藥性已成為全球關注的熱點。

我國已成為世界上細菌耐藥性最嚴重的國家之一。1997年解放軍總醫院報道大腸埃希菌對環丙沙星的耐藥率從1994年的41.9％上升至1997年的60.4％。王紅寧、朱力軍、高松等的研究表明，雞源、豬源大腸桿菌對常用抗菌藥如氨基糖苷類、氯霉素類、磺胺類等產生的耐藥率在38～95％，并且有70.2％以上的菌株是多重耐藥；郝秀紅、馬聰等對臨床病原菌的研究發現，大腸桿菌、沙門氏菌以及金葡萄球菌對慶大霉素、頭孢唑啉、青霉素的平均耐藥率超過50.0％。

分子生物學方法在細菌耐藥性方面的應用非常廣泛，與傳統的表型檢測相比，它更能準確反映耐藥性的傳播和流行趨勢。綜合比較幾種基因檢測方法，PCR方法因其操作簡單、結果準確可靠、成本較低等優點，在現有技術條件下，該方法在臨床上的應用前景將會非常廣闊。但是單基因pcr方法的最大不足之處在于檢測的指標過于單一，而多重PCR具有高效性，即在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物，或對有多個目標基因進行分型，特別是用一滴血就能檢測多種病原體。同時，多重PCR方法經濟簡便，多種病原體在同一反應管內同時檢出，將大大的節省時間，節省試劑，節約經費開支，為臨床提供更多更準確的診斷信息。

PCR檢測試劑盒能快速、準確地對細菌耐藥性進行檢測，但目前國內還未見動物源細菌耐藥性檢測試劑盒的研究和報道。

發明內容

本發明的目的是：為了克服現有技術的缺陷，獲得一種快速、穩定的動物源細菌耐藥性的檢測方法，本發明提供了一種用于檢測葡萄球菌磺胺類藥物耐藥基因的分子標記及其應用。

技術方案：一種用于檢測葡萄球菌磺胺類藥物耐藥基因的分子標記，所述分子標記及其序列為：P1，SEQ ID NO.1～2；P2，SEQ ID NO.3～4；P3，SEQ ID NO.5～6。

優選的，所述分子標記P1、P2和P3的上游引物5，端進行氨基化修飾并附加10個堿基T。

表1分子標記序列