[發(fā)明專利]一種誘導培養(yǎng)骨髓間充質干細胞的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710456918.0 | 申請日： | 2017-06-16 |
| 公開（公告）號： | CN107083357B | 公開（公告）日： | 2021-04-02 |
| 發(fā)明（設計）人： | 羅擎英;曹洪芙;吳敏;黎杉珊;張志清;陳安均;吳賀君;申光輝;劉興艷;李美良;劉耀文;蘇趙 | 申請（專利權）人： | 四川農業(yè)大學 |
| 主分類號： | C12N5/077 | 分類號： | C12N5/077;C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京匯捷知識產權代理事務所(普通合伙) 11531 | 代理人： | 于鵬 |
| 地址： | 611130 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 誘導 培養(yǎng) 骨髓 間充質 干細胞 方法 | ||
1.一種誘導培養(yǎng)骨髓間充質干細胞的方法，所述方法包括如下步驟：
(1)分離骨髓間充質干細胞；(2)利用誘導培養(yǎng)基進行培養(yǎng)；
其特征在于，在步驟(2)中，利用培養(yǎng)基A進行培養(yǎng)之后再用培養(yǎng)基B進行培養(yǎng)，所述培養(yǎng)基A的成分如下：
DMEM培養(yǎng)基、β-磷酸甘油鈉27mmol/ml、成纖維細胞因子4 22ng/ml、10％胎牛血清、青霉素300U/ml、120mmol/ml谷氨酰胺；
所述培養(yǎng)基B的成分如下：
DMEM/F12培養(yǎng)基、7mmol/ml的煙酰胺、10％胎牛血清、地塞米松1×10-8mmol/ml、腺嘌呤30μg/ml、青霉素300U/ml、氫化可的松0.1μg/ml。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，利用培養(yǎng)基A進行培養(yǎng)時，培養(yǎng)時間為7～10天。
3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，利用培養(yǎng)基B進行培養(yǎng)時，培養(yǎng)時間為17～19天。
4.根據(jù)權利要求1或2所述的方法，其特征在于，利用培養(yǎng)基A進行培養(yǎng)時，培養(yǎng)至細胞密度為40～45％。
5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，由培養(yǎng)基A替換為培養(yǎng)基B培養(yǎng)時，利用PBS對培養(yǎng)基A的殘留液體進行清洗。
6.根據(jù)權利要求3所述的方法，其特征在于，所述培養(yǎng)時間為19天。
7.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于，所述培養(yǎng)時間為7天。
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