[發明專利]一種ppt級Hg2+的安培分析方法

有效

• 申請號: 201710452959.2
• 申請日: 2017-06-15
• 公開（公告）號: CN107255669B
• 公開（公告）日: 2019-05-17
• 發明（設計）人: 謝青季;徐愛貴;肖紅波;覃曉麗;睢玉蕓;譚月明;陳超
• 申請（專利權）人: 湖南師范大學
• 主分類號: G01N27/48
• 分類號: G01N27/48;G01N27/327
• 代理公司: 長沙星耀專利事務所(普通合伙) 43205
• 代理人: 張慧;趙靜華

1.一種ppt 級Hg²⁺的安培分析方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）以酶標記的DNA電極為工作電極，在工作電極上以酶為中心，進行酶促沉積金屬的反應：在酶標記的DNA電極上加入酶促反應液，反應完成后得到富含金屬單質的電極表面；

所述酶標記的DNA電極制備步驟為：通過T-Hg²⁺-T配位，標記了生物素的信號探針與捕獲探針結合，形成復合物；標記了酶分子的親和素，再通過生物素-親和素間的作用，使酶分子與所得復合物結合，制得酶標記的DNA電極；

所述酶促反應液包括酶底物和對應的金屬鹽溶液；

所述酶為堿性磷酸酯酶；酶底物為抗壞血酸磷酸二酯鈉；所述金屬鹽為硝酸銀；

（2）將步驟（1）所得富含金屬單質的電極表面用于Hg²⁺的電化學分析，用原位陽極溶出伏安法獲得該工作電極上所富集的金屬的溶出伏安信號，從而間接實現樣品中Hg²⁺的定量分析，使得電化學方法可以檢測ppt級的Hg²⁺。

2.根據權利要求1所述的ppt 級Hg²⁺的安培分析方法，其特征在于，步驟（1）中，所述酶底物的體積為1 μL ~ 10 mL。

3.根據權利要求1或2所述的ppt 級Hg²⁺的安培分析方法，其特征在于，步驟（1）中，酶底物的濃度為1 μmol/L稀溶液~飽和溶液。

4.根據權利要求1或2所述的ppt 級Hg²⁺的安培分析方法，其特征在于，步驟（1）中，所述金屬鹽溶液濃度為1 μmol/L稀溶液~飽和溶液。

5.根據權利要求1或2所述的ppt 級Hg²⁺的安培分析方法，其特征在于，步驟（1）中，所述金屬鹽溶液的體積為1 μL ~ 10 mL。

6.根據權利要求1或2所述的ppt 級Hg²⁺的安培分析方法，其特征在于，步驟（2）中，空氣中預先施加能夠實現酶促沉積金屬的離子態電沉積的陰極電位為足夠實現擴散控制的金屬電沉積的陰極電位；所述足夠實現擴散控制的金屬電沉積的陰極電位為1.0 V vs. SCE~-0.2 V vs. SCE；“V vs. SCE”意為相對于飽和甘汞電極的電位。

7.根據權利要求1或2所述的ppt 級Hg²⁺的安培分析方法，其特征在于，步驟（2）中，使用陽極溶出伏安法對金屬離子進行定量分析時，采用兩電極或三電極體系。