[發明專利]一種細胞列陣原位雜交的系統及方法

在審

• 申請號: 201710450831.2
• 申請日: 2017-06-15
• 公開（公告）號: CN109136060A
• 公開（公告）日: 2019-01-04
• 發明（設計）人: 林小靖;曹健榮;王承
• 申請（專利權）人: 德諾杰億（北京）生物科技有限公司
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12M1/38;C12M1/36
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司 11279
• 代理人: 田昕;葉立濤

1.一種細胞列陣原位雜交的系統，其特征在于：包括細胞列陣芯片和流入液體控制裝置，其中：

所述細胞列陣芯片，包括基板和固定連接在基板表面的細胞收集單元，所述細胞收集單元包括：細胞收集單元入口、細胞收集路徑、細胞繞行路徑和細胞收集單元出口，所述細胞收集路徑的入口、所述細胞繞行路徑的入口與所述細胞收集單元入口相連通，所述細胞收集路徑的出口、所述細胞繞行路徑的出口與所述細胞收集單元出口相連通；所述細胞收集路徑包括按細胞運動方向串聯的細胞通過路徑和細胞阻攔路徑；所述細胞收集單元入口、細胞通過路徑、細胞繞行路徑和細胞收集單元出口以上四者的最小尺寸處使細胞能通過，所述細胞阻攔路徑的最小尺寸處使細胞不能通過；

所述流入液體控制裝置，用于控制作為細胞列陣芯片入口的細胞收集單元入口的流入液體的參數。

2.根據權利要求1所述的系統，其特征在于：所述細胞通過路徑的長度大于所收集的細胞直徑，可選的，為所收集的細胞直徑的1.5倍-2倍；所述細胞阻攔路徑的長度大于所收集的細胞直徑，可選的，為所收集的細胞直徑的1.5倍-2倍。

3.根據權利要求1所述的系統，其特征在于：所述流入液體控制裝置包括：

細胞懸液通道；

試劑通道；

多路轉換閥，其控制作為細胞列陣芯片入口的細胞收集單元入口與細胞懸液通道的出口或與試劑通道的出口相連通；和

驅動裝置，其為細胞懸液通道或試劑通道中的液體流動提供動力。

4.根據權利要求3所述的系統，其特征在于：所述試劑通道為至少2個。

5.根據權利要求1所述的系統，其特征在于：還包括溫度控制裝置，用于控制細胞列陣芯片的溫度。

6.根據權利要求1所述的系統，其特征在于：還包括濕度控制裝置，用于控制細胞列陣芯片的濕度。

7.根據權利要求6所述的系統，其特征在于：所述濕度控制裝置包括：

濕度保持罩，其包圍在細胞列陣芯片外部；

促進氣體流通裝置，其設置在濕度保持罩內、細胞列陣芯片的上方；和

流通管道，其出口與濕度保持罩內部相連通。

8.根據權利要求7所述的系統，其特征在于：所述流通管道上還設置有閥門，使流通管道的入口可以分別與干燥氣體來源或濕潤氣體來源相連通。

9.根據權利要求1所述的系統，其特征在于：所述細胞收集單元的材質為聚二甲基硅氧烷；所述基板的材質為玻璃；所述基板和所述細胞收集單元的連接方式為鍵合連接。

10.一種細胞列陣原位雜交方法，包括以下步驟：

(1)將細胞懸液注入到上述細胞列陣原位雜交的系統的作為細胞列陣芯片入口的細胞收集單元入口中，隨著細胞懸液在細胞收集單元中流動形成使細胞分散開的細胞列陣；

(2)先后向形成的細胞列陣中通入低滲液和固定液對細胞進行處理，使細胞中的染色體暴露；

(3)向形成的細胞列陣中通入探針混合物與染色體雜交；

(4)向形成的細胞列陣中通入洗滌液，洗去多余探針混合物；

(5)向形成的細胞列陣中通入DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)對細胞核進行染色，在細胞列陣中完成細胞原位雜交。