[發(fā)明專利]測定乳制品中甲氧芐啶的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710448399.3
• 申請(qǐng)日: 2017-06-14
• 公開（公告）號(hào): CN107132294A
• 公開（公告）日: 2017-09-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李燕;張斌;張葉芳;杜慧麗;米星萍;張?jiān)契r;田權(quán)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 北京清亦華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11201
• 代理人: 趙天月

1.一種測定牛奶中甲氧芐啶的方法，其特征在于，包括：

(1)提取：

1)取(5±0.05)g牛奶于50ml具塞離心管中，加15ml 5％乙酸水溶液-甲醇溶液(體積比為70：30)，加1ml乙酸鉛(200g/l)、7ml三氯甲烷，漩渦混合1min，超聲提取5min，8000rpm下離心2min，收集上清液；

2)將下層殘留物用15ml 5％乙酸水溶液-甲醇溶液(體積比為70：30)和1ml乙酸鉛(200g/l)，按照步驟1)重復(fù)提取一次，合并兩次上清液，得到提取液。

(2)采用固相萃取柱對(duì)所述提取液進(jìn)行凈化處理：

1)活化：5ml甲醇和5ml活化液活化；

2)上樣：加入所述提取液，棄去流出液；

3)淋洗：依次加入5ml 5％乙酸水溶液-甲醇溶液，5ml甲醇，棄去流出液；

4)洗脫：加入6ml 5％氨水-甲醇溶液，收集流出液，置于40℃下氮吹至干，用1.0ml流動(dòng)相溶解殘余物，濾膜過濾，得到上樣液。

(3)將所述上樣液進(jìn)行色譜檢測：

色譜柱：Diamonsil C18(2)，250mm×4.6mm，粒徑5μm；

流動(dòng)相：0.1％甲酸水溶液：甲醇(體積比為78：22)；

流速：1.0ml/min；

柱溫：30℃；

進(jìn)樣量：20μl；

檢測波長：230nm。

(4)基于色譜檢測結(jié)果，以便確定所述牛奶中甲氧芐啶含量。

2.一種測定乳制品中甲氧芐啶的方法，其特征在于，包括：

利用乙酸水溶液-甲醇溶液和乙酸鉛溶液對(duì)所述乳制品進(jìn)行提取處理，以便得到提取液；

對(duì)所述提取液進(jìn)行凈化處理，以便得到凈化液；以及

對(duì)所述凈化液進(jìn)行色譜檢測，以便確定所述乳制品中甲氧芐啶含量。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，進(jìn)一步包括：

利用所述乙酸水溶液-甲醇溶液、所述乙酸鉛溶液和三氯甲烷對(duì)所述乳制品進(jìn)行提取處理。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述乙酸水溶液濃度為5質(zhì)量％，所述乙酸水溶液-甲醇溶液中乙酸水溶液和甲醇的體積比為70：30。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述乙酸鉛溶液濃度為200g/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述提取處理包括：

將所述乳制品、所述乙酸水溶液-甲醇溶液、所述乙酸鉛溶液以及三氯甲烷進(jìn)行第一混合，并離心，得到第一上清液和第一下層殘留物；以及

將所述第一下層殘留物、所述乙酸水溶液-甲醇溶液和所述乙酸鉛溶液進(jìn)行第二混合，并離心，得到第二上清液，合并所述第一上清液和第二上清液，以便得到所述提取液。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，基于4.5～6.5g所述乳制品，所述第一混合和第二混合中，所述乙酸水溶液-甲醇溶液的用量均為15mL，所述乙酸鉛溶液的用量均為1mL，所述三氯甲烷的用量為7mL。

8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，采用固相萃取柱進(jìn)行所述凈化處理。

9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述凈化處理包括：

利用甲醇和活化液對(duì)所述固相萃取柱進(jìn)行活化處理；

向活化后的固相萃取柱中加入所述提取液，棄去流出液；

依次向所述固相萃取柱中加入5mL所述乙酸水溶液-甲醇溶液以及5mL甲醇，棄去流出液；以及

向所述固相萃取柱中加入6mL 5％氨水-甲醇溶液，收集流出液，置于40℃下干燥，用1.0mL所述色譜檢測所需的流動(dòng)相進(jìn)行溶解，以便得到所述凈化液。

10.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述色譜檢測的條件如下：

色譜柱：Diamonsil C18(2)，250mm×4.6mm，粒徑5μm；

流動(dòng)相：體積比為78：22的0.1％甲酸水溶液-甲醇溶液；

流速：1.0ml/min；

柱溫：30℃；

進(jìn)樣量：20μl；以及

檢測波長：230nm。