[發明專利]一種鎮痛藥配方及其提取方法和測試方法

有效

• 申請號: 201710447705.1
• 申請日: 2017-06-14
• 公開（公告）號: CN107184671B
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 黃先菊;李竣
• 申請（專利權）人: 中南民族大學
• 主分類號: A61K36/714
• 分類號: A61K36/714;A61P29/00;A61K49/00
• 代理公司: 深圳市六加知識產權代理有限公司 44372
• 代理人: 宋建平

1.一種鎮痛藥配方產品，其特征在于，包括：

從金不換提取的活性成分WVBF；

從雪上一枝蒿中提取的總生物堿CFA；

所述活性成分WVBF和總生物堿CFA按照預設的比例進行混合，得到鎮痛藥；其中，預設的比例具體為WVBF和CFA之間的質量比重為1:2或者1:5；

其中，在中樞鎮痛方面1:2比例給藥組有減毒存效作用，而1:5比例給藥組有減毒增效作用；

其中，預設的比例具體通過以下的測試過程確定得到：

根據CFA與WVBF配比心血管毒性評價測試，確定能夠緩解心血管毒性表型和/或不誘發明顯的心血管毒性表型的一組或者多組配比；

根據CFA與WVBF配比心血管毒性評價測試得到的一組或者多組配比，用于CFA配伍WVBF的急性毒性測試，得到各組配比的LD₅₀值；

根據CFA與WVBF配比心血管毒性評價測試得到的一組或者多組配比，用于CFA配伍WVBF對熱板法小鼠痛閾值測試，得到各自對應預設時段的鎮痛率；

根據CFA與WVBF配比心血管毒性評價測試得到的一組或者多組配比，用于CFA配伍WVBF對冰醋酸所致扭體反應測試，得到各自對應預設時段的扭體抑制率；

WVBF的制備方法包括：

取金不換生藥材，置于容器中，并向所述容器加入蒸餾水；

將所述容器放置在電熱爐上加熱至蒸餾水沸騰，加熱3h后抽濾得到第一份提取液；

分別再加熱2h后進行抽濾得到第二份提取液，以及再加熱1h后進行抽濾得到第三份提取液；

合并所示第一份提取液、第二份提取液和第三份提取液，減壓除去溶劑得干燥粉末；

雪上一枝蒿的總生物堿CFA的制備方法包括：

取雪上一枝蒿塊根粉末，置于容器中，并加入95%乙醇；

水浴加熱容器至沸騰，3h后抽濾；

分別再加熱2h后進行抽濾，以及再加熱1h后進行抽濾；

抽濾后合并提取液，減壓回收溶劑得到浸膏；

浸膏加入濃度為2%的 H2SO4溶液進行混懸，石油醚脫脂，氨水調整pH到9，三氯甲烷萃取至有機相澄清，合并萃取液，濃縮干燥，得到總生物堿CFA。

2.根據權利要求1所述的鎮痛藥配方產品，其特征在于，在金不換生藥材為500 g時，所述容器具體采用3 L容量的燒杯，則所述蒸餾水的劑量為2L。

3.根據權利要求1所述的鎮痛藥配方產品，其特征在于，在雪上一枝蒿塊根粉末500 g時，將所述雪上一枝蒿塊根粉末500 g，置于3 000 mL 圓底燒瓶中，加入2L濃度為95 %乙醇；

其中，所述濃度為2% 的H2SO4溶液的劑量為1 L。

4.根據權利要求1所述的鎮痛藥配方產品，其特征在于，所述CFA與WVBF配比心血管毒性評價測試，具體包括：

在飼養有斑馬魚的六孔板中分別水溶給予66.6μg/mL的CFA、及其與WVBF不同的配比：1:5、1:2、2:1和5:1濃度，設置溶劑對照組和正常對照組；

供試品處理斑馬魚4小時后，每個實驗組隨機選擇10尾斑馬魚在顯微鏡下記錄并統計斑馬魚心率，計算相對心率，并觀察有無心律不齊；若發生心律不齊，則分別計數心房率和心室率；

供試品處理斑馬魚24小時后，每個實驗組隨機選擇10尾斑馬魚，同樣在顯微鏡下觀察有無心包水腫、血流異常、血栓和/或出血，并統計其發生率；

其中，所述發生率大于第一預設閾值而小于第二預設閾值，則表明能夠緩解心血管毒性表型；所述發生率小于第一預設閾值，則表明沒有誘發明顯的心血管毒性表型。