[發明專利]一種生物分子檢測方法

在審

• 申請號: 201710446455.X
• 申請日: 2017-06-14
• 公開（公告）號: CN107338288A
• 公開（公告）日: 2017-11-10
• 發明（設計）人: 楊華衛;曾冀
• 申請（專利權）人: 楊華衛;曾冀
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12M1/34
• 代理公司: 北京聿華聯合知識產權代理有限公司11611
• 代理人: 劉烽

技術領域

本發明屬于生物檢測技術領域，具體涉及一種生物分子檢測方法。

背景技術

在傳統膜芯片的生物分子檢測中，需要將每個待測樣本逐個地依次加入到芯片孔或槽中進行孵育。然后，將孵育后的樣本從芯片孔或槽中逐個地移除，并多次地將洗滌液依次加入用來檢測的孔或槽中進行洗滌。洗滌之后，將反應液依次加入孔或槽中進行反應，反應后的液體需要逐個地依次移除。在移除了反應后的液體之后，需要進行多次洗滌用來檢測的孔或槽，并將孔或槽中的液體移除。之后，需要將作為檢測信號的液體逐個孔或槽地依次加入進行反應。反應之后，需要在每個孔或槽中依次加入中止液混勻來讀取檢測數據。

在傳統玻璃芯片的生物分子檢測中，需要把每個反應樣本溶液加到芯片表面，然后把玻璃芯片封閉在塑料芯片盒里卡緊。芯片盒置于水浴鍋加熱幾小時，或者空氣浴加熱過夜。之后取出芯片盒，拆開芯片盒并取出芯片，放到燒杯中。分兩次加入洗滌液進行搖洗，之后取出芯片并吹干。之后再放入芯片掃描儀閱讀。

生物分子的傳統的檢測方法操作步驟繁多、檢測時間長，且由于不同樣本之間存在處理時間間隔，導致檢測結果誤差大。因此，有必要提出新的生物分子檢測方法來提高檢測效率，降低檢測誤差。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提出了一種新的生物分子檢測方法，包括以下步驟：

步驟一、提供生物芯片(或稱為生物芯片裝置)，所述生物芯片包括：

基托，

以陣列的形式安裝在基托上的若干芯片柄，芯片柄沿垂直于基托的方向相互平行地從基托中伸出；和

布置在各個芯片柄的自由端處的芯片反應界面，芯片反應界面的縱向布置成與芯片柄的縱向重合；

步驟二、在各個芯片反應界面上分別固定用于特異性檢測待測生物分子的檢測探針；

步驟三、使各個芯片反應界面與待測樣品接觸，以檢測待測樣品中的待測生物分子；和

步驟四、獲取各個芯片反應界面的檢測信號。

根據本發明提供的檢測方式，使用一種由若干個由芯片柄和芯片反應界面組合形成的生物芯片單元在一維、二維或三維上以陣列的形式安裝在基托上形成的生物芯片裝置來檢測生物分子。

在步驟二中，可單獨地對每一個芯片反應界面固定檢測探針，也可以同時對所有的芯片反應界面進行檢測探針的固定。優選地，同時在各個芯片反應界面上分別固定用于特異性檢測待測生物分子的檢測探針。

在檢測待測樣本中，需要將芯片反應界面進入待測樣本溶液中，使芯片反應界面上固定的檢測探針與待測樣本中的生物分子充分接觸反應。在步驟三中，所有的芯片反應界面可以浸入同一個待測樣本中，實現芯片反應界面上各檢測探針對待測樣本中的生物分子的檢測；也可以使每個芯片反應界面分別浸入各自的待測樣本中，即芯片柄和芯片反應界面組合形成的生物芯片單元與待測樣本一一對應，實現多個芯片反應界面同時對多個組成相同或不同的待測樣本的檢測。在本發明的一些優選實施方式中，在步驟三中，使各個芯片反應界面同時分別與各個待測樣本接觸。

如本領域技術人員所熟知的，在生物分子的檢測過程中，在芯片與待測樣本接觸反應后，可根據需要對芯片進行洗滌、干燥等后處理，然后再對其進行檢測信號檢測。根據本發明的一些優選實施方式，在步驟三中，使各個芯片反應界面同時分別與各個待測樣本接觸，并對各個芯片反應界面同時實施后處理。即在檢測過程中，可實現對若干個待測樣本同步檢測，從而在最短時間內實現批量處理。由于不管是在與待測樣本的接觸還是對芯片進行洗滌等后處理過程中都消除了各個待測樣本檢測之間的時間差(各芯片反應界面同時同步移動)，使得待測樣本之間的檢測結果對比的誤差降至最低，從而提高檢測結果準確性，并極大地提高了檢測效率。

由于采用了特定結構的生物芯片裝置，本發明在步驟四中，同樣可以實現單個芯片反應界面的信號采集或同時獲取所有芯片反應界面的檢測信號。作為本發明的一些優選實施方式，在步驟四中，同時獲取各個芯片反應界面的檢測信號。由此，消除了本發明提供的檢測方法的每一個步驟中對各個待測樣本的檢測時間差，從而有利于對各個待測樣本的生物分子含量情況進行精確的橫向比較。

此外，芯片反應界面的縱向布置成與芯片柄的縱向重合的技術方案可以縮小使用的反應槽的體積，對于樣本量較少的情況特別適用。或者，可以縮小使用的反應槽的橫截面積，由此可在單位面積內增加反應槽的數量，對于發展便攜式檢測設備尤為有利。

根據本發明，所述檢測探針是待測生物分子的特異性的生物分子探針，例如可以是核酸探針(例如寡核苷酸探針)和/或蛋白探針(例如抗原探針、抗體探針)，或者其他生物分子探針。