[發(fā)明專利]一種在蛋白納米籠內(nèi)部包裝外源物質(zhì)的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710445882.6 | 申請(qǐng)日： | 2017-06-14 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN107164339A | 公開（公告）日： | 2017-09-15 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 李峰;李玲玲 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所 |
| 主分類號(hào)： | C12N7/04 | 分類號(hào)： | C12N7/04 |
| 代理公司： | 北京同輝知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11357 | 代理人： | 劉洪勛 |
| 地址： | 430071 湖北*** | 國(guó)省代碼： | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 蛋白 納米 內(nèi)部 包裝 物質(zhì) 方法 | ||
1.一種在蛋白納米籠內(nèi)部包裝外源物質(zhì)的方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1：測(cè)出蛋白籠的臨界組裝濃度；
S2：將蛋白籠解聚成寡聚體，用組裝緩沖液稀釋寡聚體，直至蛋白籠組分的濃度低于臨界組裝濃度；
S3：向稀釋的寡聚體中加入外源物質(zhì)并混勻，得到混合物，濃縮該混合物，直至蛋白籠組分的濃度高于臨界組裝濃度使組裝暨包裝發(fā)生，純化即可。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種在蛋白納米籠內(nèi)部包裝外源物質(zhì)的方法，其特征在于：所述步驟S1中，蛋白籠的臨界組裝濃度的測(cè)定包括以下步驟：
S11：配制系列蛋白籠組分濃度呈梯度變化的寡聚體溶液，并分別透析到組裝緩沖液中，得到蛋白液；
S12：將蛋白液離心并取上清液，將上清液作為超濾初始液進(jìn)行超濾，取濾過液；
S13：以蛋白籠組分濃度的自然對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，濾過液與超濾初始液的蛋白濃度比值為縱坐標(biāo)，作散點(diǎn)圖，擬合玻爾茲曼類型的曲線，曲線斜率絕對(duì)值最大時(shí)橫坐標(biāo)對(duì)應(yīng)的蛋白濃度即為臨界組裝濃度。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種在蛋白納米籠內(nèi)部包裝外源物質(zhì)的方法，其特征在于：所述步驟S12中，蛋白液離心轉(zhuǎn)速為10000rpm，離心時(shí)間為10-30min，超濾上清液的超濾管截留分子量為100KD，超濾轉(zhuǎn)速為4000rpm，超濾時(shí)間為10-30min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種在蛋白納米籠內(nèi)部包裝外源物質(zhì)的方法，其特征在于：所述步驟S3中，用聚乙二醇20000濃縮混合物，直至蛋白籠組分的濃度高于臨界組裝濃度，使組裝暨包裝發(fā)生，采用蔗糖密度梯度離心的方法純化包裝后的產(chǎn)物。
5.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的一種在蛋白納米籠內(nèi)部包裝外源物質(zhì)的方法，其特征在于：所述濃縮混合物及超濾上清液的過程均在4℃環(huán)境下進(jìn)行。
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