[發(fā)明專利]一種用于降低糧果蔬重金屬含量的發(fā)酵菌劑的制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201710445017.1
• 申請日: 2017-06-12
• 公開（公告）號: CN109022286A
• 公開（公告）日: 2018-12-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 朱振元;董海燕;宋巧英
• 申請（專利權(quán)）人: 天津科技大學(xué)
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C09K17/14;A01N63/04;A01P21/00;C12R1/885;C09K101/00
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本發(fā)明涉及一種用于降低農(nóng)作物重金屬含量的固體微生物菌劑，以農(nóng)作物下腳料為基料，微生物固體發(fā)酵后生產(chǎn)出能夠降低農(nóng)作物重金屬的菌劑。其中：所述重金屬主要為鉛，所述物料包括米糠和麩皮，所述微生物為實驗室從土壤中分離的一株棘孢木霉(Trichoderma asperellum)。本發(fā)明可以解決目前農(nóng)作物重金屬超標(biāo)，對人體和農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展造成嚴(yán)重?fù)p失以及重金屬污染土地修復(fù)難的問題。同時可以解決農(nóng)作物下腳料的再利用問題。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及環(huán)境污染的微生物修復(fù)技術(shù)。具體涉及一種能夠減少糧果蔬吸收重金屬鉛的棘孢木霉菌株，以及含有該棘孢木霉菌的微生物菌劑，還涉及它們在減少糧果蔬吸收重金屬鉛方面的應(yīng)用。

背景技術(shù)

重金屬污染是目前國際上嚴(yán)峻的土壤污染問題之一。鉛及其化合物是常見的環(huán)境重金屬污染物，主要來源于人類的生活和生產(chǎn)活動。煤燃燒、汽車尾氣排放、蓄電池生產(chǎn)、礦石開采、肥料使用等都會導(dǎo)致鉛元素進(jìn)入大氣、水和士壤，由此引發(fā)鉛環(huán)境污染問題。研究證明，鉛進(jìn)入植物體造成根系傷害外，葉片中的鉛將取代中心鎂離子，破壞葉肉中葉綠體結(jié)構(gòu)和影響葉綠素酶的活性，引起葉綠素含量下降。葉綠素遭受破壞后，光合作用能力減弱。同時它還可以通過植物根系在植物體內(nèi)富積，并且可以通過食物鏈進(jìn)入人體和動物體內(nèi)危害其健康。

據(jù)2014年全國土壤污染調(diào)查公報顯示，全國土壤總的超標(biāo)率為16.1％，其中輕微、輕度、中度和重度污染點位比例分別為11.2％、2.3％、1.5％和1.1％。污染類型以無機(jī)型為主，有機(jī)型次之，復(fù)合型污染比重較小，無機(jī)污染物超標(biāo)點位數(shù)占全部超標(biāo)點位的82.8％。其中無機(jī)污染物主要以鎘、汞、砷、銅、鉛、鉻、鋅、鎳8種為主。傳統(tǒng)的土壤重金屬污染治理往往采取先停耕治理然后復(fù)耕的方法，費時費力。由于土壤污染可來源于灌溉水、大氣循環(huán)等，治理完成一段時間后往往會再次污染。

因此，本發(fā)明可以在很大程度上解決土壤重金屬污染治理反復(fù)的問題，利用從土壤中分離所得的一株棘孢木霉菌株發(fā)酵制得菌劑。在植物生長過程中施用，可有效減少植物體對鉛的富集，調(diào)節(jié)植物根圈微生物菌群，并可作為有機(jī)肥料供植物生長利用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種用于降低糧果蔬重金屬含量的發(fā)酵菌劑。可以避免土壤修復(fù)過程中治理反復(fù)，在農(nóng)作物耕種的同時一同施用，并能夠作為有機(jī)肥料提供一部分植物生長所需養(yǎng)分。同時提高農(nóng)作物下腳料米糠、麩皮的利用價值。

本發(fā)明的生產(chǎn)技術(shù)方案如下：

本發(fā)明涉及一種木霉，從土壤分離純化中得到。利用形態(tài)特征，培養(yǎng)性狀，生理生化特征等微生物學(xué) 特征以及ITS rDNA序列同源性分析等方法鑒定該木霉為棘孢木霉(Trichoderma asperellum)。該菌株已于 中國科學(xué)院微生物研究所，中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，地址為北京市朝陽區(qū)北 辰西路1號院3號。保藏日期為2016年01月14日，保藏號為CGMCC No.12071。

(1)以重量分?jǐn)?shù)計，麩皮58份，米糠38.5份，硫酸鋅2份，蛋白胨1份，蔗糖0.5份，加入75％的去離子水配制成固體培養(yǎng)基，滅菌后備用。

(2)對棘孢木霉菌株進(jìn)行培養(yǎng)，得種子液；

將步驟(2)所得種子液接種到步驟(1)的固體培養(yǎng)基上發(fā)酵。

(3)發(fā)酵產(chǎn)品取出后烘干粉碎即得微生物菌劑。

(4)本發(fā)明所述的微生物菌劑制備方法中，步驟(1)所述的固體培養(yǎng)基配制完成后盛裝在第發(fā)酵盒中滅菌并進(jìn)行后續(xù)的培養(yǎng)，培養(yǎng)基厚度2.5cm。

步驟(4)所述發(fā)酵盒外覆有耐高溫的聚丙烯塑料袋，并在開口處塞有棉塞，以保證通氣，保持水分。

本發(fā)明所述的微生物菌劑制備方法中，步驟(2)所得的種子液的制備包括如下步驟：