[發明專利]抗人血管內皮生長因子的抗體及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710444942.2
• 申請日: 2017-06-12
• 公開（公告）號: CN109021103B
• 公開（公告）日: 2022-08-23
• 發明（設計）人: 何姍;段清;鄧長靜;金磊;劉禮樂;孫志武;邵曉慧;張潔;胡少平;徐輝;楊欣秀;張瑜
• 申請（專利權）人: 上海睿智化學研究有限公司;凱惠睿智生物科技（上海）有限公司
• 主分類號: C07K16/22
• 分類號: C07K16/22;C12N15/13;C12N15/63;A61K39/395;A61P35/00;A61P27/02;A61P3/10;A61P9/14;A61P29/00;A61P17/00
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦;朱水平

本發明公開了一種抗人血管內皮生長因子(VEGFA)的抗體及其制備方法和應用。該VEGFA抗體的重鏈可變區包括CDR1、CDR2和CDR3中的一種或多種，其氨基酸序列和核酸序列分別如本發明中所述。VEGFA抗體具有高親和力和高生物學活性，與VEGF能很好地結合，并抑制或阻斷VEGF與VEGFR的結合，從而影響其后續的信號通路以及相應的生物學功能，其在抗腫瘤、年齡相關性黃斑變性、糖尿病性視網膜病變、干癬、類風濕關節炎和慢性炎癥中可以有很好的應用。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種抗人血管內皮生長因子的抗體及其制備方法和應用。

背景技術

血管發生是指通過內皮細胞的生長、分化和轉移，從既存的血管形成新的血管的機制。眾所周知，血管發生在創傷治愈以及女性的生理周期等正常生長過程中起重要作用(Risau,Nature,1997,386:671)，非正常的過度血管發生在腫瘤的生長和轉移，以及年齡相關性黃斑變性(ARMD)、糖尿病性視網膜病變、干癬、類風濕關節炎、慢性炎癥等疾病的發作中起關鍵作用(Carmeliet and Jain,Nature,2000,407:249)。

血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)，亦稱作血管內皮生長因子A(vascular endothelial growth factor a，即VEGFA)，在血管生成過程的多個步驟中有重要作用，其在腫瘤區域的缺氧部位廣泛分泌。VEGF已知有4個同種型VEGF121、VEGF165、VEGF189和VEGF206。報道指出VEGF165在除胎盤外的全部人類組織中大量存在(Tisher et al.,J Biol Chem,1991,266:11947)。已知VEGF以極高的親和性與其受體VEGFR-1和VEGFR-2結合，但也通過VEGFR-2傳遞信號，誘導血管內皮細胞的增殖和轉移等與血管發生相關的機制。因此，VEGF和VEGFR-2被當作抑制由VEGF誘導的血管發生機制的主要靶標(Ellis et al.,Nature Rev Cancer,2008(8):579-591；Youssoufian et al.,ClinCancer Res,2007,(13):5544-5548)。Genentech公司的Avastin是一種針對VEGF的人源化抗體(Ferrara et al.,Biochem.Biophy Res Comm,2005,333(2):328-335)已被美國食品與藥品管理局(FDA)分別在2004年批準用于轉移性結腸癌、在2006年批準用于非小細胞性肺癌和在2008年批準用于Her-2陰性轉移性乳腺癌，并進入市場。近年，進行了大量對各種實體腫瘤的臨床試驗以擴大其適應癥。此外，該公司購得的Lucentis是一種通過消化Avastin的僅一個Fab片斷而產生的抗體，能提高當Lucentis被注射入視網膜時的滲透性，從而作為抑制老年性黃斑變性的主要癥狀的黃斑下過度血管發生(Eter et al.，Biodrugs,2006,(20):167-179)，其在2006年被美國FDA批準作為治療濕性年齡相關性黃斑變性(濕性-ARMD)的治療劑。另一個靶向VEGF的治療用抗體是Regeneron公司的VEGF-trap(Holash et al.,PNAS,2002,(99):11393-11398)。這是一種將VEGFR-1的第二免疫球蛋白域和VEGFR-2的第三免疫球蛋白域融合于人類Fc獲得的水溶性“誘餌受體”，在2011年獲得美國FDA批準，用于治療濕性黃斑變性。