[發明專利]基于eGFP的GPR120基因表達的檢測方法及應用在審
| 申請號： | 201710443881.8 | 申請日： | 2017-06-13 |
| 公開（公告）號： | CN107227352A | 公開（公告）日： | 2017-10-03 |
| 發明（設計）人： | 趙玉峰;蘇興利;徐曦;閆愛麗;謝榮;魏蘭蘭;劉英光;陳鏑;梁向艷;趙妍妍 | 申請（專利權）人： | 西安醫學院 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/85 |
| 代理公司： | 西安弘理專利事務所61214 | 代理人： | 許志蛟 |
| 地址： | 710021 *** | 國省代碼： | 陜西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 egfp gpr120 基因 表達 檢測 方法 應用 | ||
【權利要求書】：
1.eGFP在GPR120基因表達水平的檢測中的應用。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述eGFP與GPR120基因表達水平的呈線性關系，即隨著eGFP熒光平均強度值的增加，GPR120基因表達水平增加。
3.基于eGFP的GPR120基因表達水平的檢測方法，具體步驟如下：
步驟1，首先通過CRISPR/Cas9技術將eGFP片段定點插入到GPR120基因的終止密碼子TAA處，使eGFP隨GPR120表達而表達，獲得eGFP標記GPR120陽性細胞的轉基因模型小鼠；
步驟2，隨后應用熒光分析儀在488nm激光激發下對小鼠的陽性細胞熒光強度進行測定。
4.根據權利要求3所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟2的熒光強度通過單細胞平均熒光強度進行表達。
5.根據權利要求3所述的檢測方法，其特征在于，所述的步驟2的具體步驟：
步驟2.1，使用沒有被eGFP標定的小鼠細胞進行熒光分析儀的激光強度指標校正；
步驟2.2，收取步驟1中轉基因模型小鼠的不同組織的eGFP陽性細胞，通過經步驟2.1校正后的熒光分析儀進行熒光強度測定，獲取eGFP與GPR120基因表達水平之間的關系；同時通過RT-PCR方法檢測eGFP陽性細胞中GPR120的基因表達水平，驗證eGFP與GPR120基因表達水平之間的關系。
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