[發明專利]形態學計量的方法檢測機體內分泌指標判斷飲酒對健康的影響

在審

• 申請號: 201710440013.4
• 申請日: 2017-06-12
• 公開（公告）號: CN109008949A
• 公開（公告）日: 2018-12-18
• 發明（設計）人: 梁文妹;夏白娟;尹丹;李一欣;李容瑢
• 申請（專利權）人: 貴州醫科大學
• 主分類號: A61B5/00
• 分類號: A61B5/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種檢測適量飲酒對健康的影響的形態學計量法，屬于醫學動物實驗方法；通過建立大鼠飲酒模型，從多個內分泌器官的激素表達情況來反映全身機體情況，為健康飲酒提供一定的基礎實驗資料。選用健康成年雄性SD大鼠，隨機分為正常對照組和實驗組，實驗組大鼠予以食用白酒灌胃后取胰腺組織、睪丸組織、垂體組織，采用免疫組化SABC法、圖像分析法進行研究。本發明具有較好的穩定性和可重復性，模擬健康成年人飲酒習慣。免疫組織化學的方法具有較高特異性，穩定、直觀，直接觀察特定激素的原位表達，并采用圖像分析對免疫組化結果進行定量，該方法用于判斷飲酒對健康影響鮮有報道。

技術領域

背景技術：白酒主要成分是水和酒精，占總量的98％，其余非酒精成分占2％，其中包括酯類、醇類、有機酸、氨基酸及其它微量元素等。近年來隨著酒文化的不斷發展，飲酒對健康的影響越來越受到大家的關注。適量飲酒對人體的健康也有著一定的益處(和血益氣、壯身御寒、辟邪逐穢)，而且也不會損害男性生殖的健康。但另一方面，過量飲酒又會對消化系統(肝臟、胰腺、胃腸道等)、心血管系統、中樞神經系統、生殖系統、免疫系統等重要臟器造成嚴重損害，嚴重者甚至危及生命。

長期過量酒精攝入會破壞胰島B細胞合成分泌胰島素(Insulin，Ins)。酒精的代謝產物乙醛和乙酸可能刺激胰高血糖素(glucagon，Glu)分泌。也有研究表明，適量飲酒對血糖控制有益，可降低普通人群糖尿病的發病率。而飲酒對男性睪酮合成分泌的影響更是受到極大的關注。當前關于飲酒對睪酮合成分泌的影響有不同的觀點。有研究指出過度飲酒會導致精子生成障礙及血清睪酮、FSH、LH等激素下降。但也有調查顯示少劑量飲酒者的睪酮水平與不飲酒者的睪酮水平相比較并無明顯差異。男性適度飲酒并不損害生殖健康，而酗酒對精液質量和男性生殖激素均會造成影響，其危害主要來自于睪酮的改變。血液中睪酮有90％以上是由睪丸間質細胞合成，為類固醇激素。睪丸間質細胞內類固醇激素急性調節蛋白(Steroidogenic Acute Regulatory Protein，StAR)廣泛存在于類固醇合成組織當中，StAR是睪酮合成過程中的限速步驟之一，推測StAR蛋白水平的變化與睪酮合成的速度存在平行關系，但與睪酮合成的量并不存在平行關系。睪丸組織中的EGF主要由睪丸間質細胞合成分泌，可以促進睪酮的合成。而且表皮生長因子(Epidermal growth factor，EGF)在精子發生過程中也起著重要的作用。嗜鉻顆粒素A(Chromogranin A，CgA)常伴促黃體生成激素和/或促卵泡成熟激素存在于促性腺細胞的分泌顆粒中，其表達與促性腺激素釋放激素。促腎上腺皮質激素(adrenocorticotrophic hormone，ACTH)在垂體合成和分泌，是維持腎上腺正常功能的重要激素，刺激腎上腺皮質激素的分泌。有報道，給大鼠急性靜脈注射酒精之后觀察到ACTH的釋放增加。酒精中毒患者血中ACTH濃度升高，并能刺激腎上腺雄性激素的分泌。

如何飲酒才可降低或消除其對健康的危害，已成為眾多學者關注的焦點問題之一。

發明內容：

本發明在建立較穩定大鼠飲酒模型及形態學計量的優勢上，通過模擬正常人飲酒，可直接觀察到不同灌胃時長及劑量灌胃后大鼠胰腺、睪丸、垂體相關指標的原位表達，檢測特定內分泌腺的特定激素表達的變化作為判斷飲酒對機體健康的影響。本發明已通過多個內分泌器官的結果測定反映飲酒對全身機體的影響，以此為適量飲酒提供一定的實驗依據。

為了實現上述目的，本發明采用的技術方案具體步驟如下：

1.大鼠適量飲酒模型構建，其特征在于具體方法步驟如下：

(1)選取健康成年SD大鼠，180g～220g/只，適應性喂養一周；

(2)分為4周組(4w)、8周組(8w)、12周組(12w)，每個時間點又低劑量組(Low dosegroup，LG，0.8ml/kg·d)、中劑量組(Middle dose group，MG，1.6ml/kg·d)、高劑量組(High dose group，HG，2.4ml/kg·d)，每日11：00AM及5：00PM各灌胃一次至取材前一日。