[發明專利]硅柱快速再生方法有效
| 申請號: | 201710437190.7 | 申請日: | 2017-06-12 |
| 公開(公告)號: | CN107083384B | 公開(公告)日: | 2019-12-17 |
| 發明(設計)人: | 鄧文生;周穎 | 申請(專利權)人: | 武漢科技大學 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 51241 成都方圓聿聯專利代理事務所(普通合伙) | 代理人: | 曹少華 |
| 地址: | 430081 湖北省武漢*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 硅柱 再生液 再生 抽提試劑盒 蒸餾水清洗 加蒸餾水 節約資源 磷酸溶液 清潔試劑 瓊脂糖膠 去離子水 清洗 生物技術 殘留 節約 重復 環保 資金 | ||
本發明屬于生物技術與方法領域,具體為硅柱快速再生方法,取硅柱加蒸餾水,進行離心分離,再加入硅柱再生液,靜置3分鐘進行離心分離;硅柱再生液為磷酸溶液;重復五次,用L蒸餾水清洗后進行離心分離,除盡硅柱中殘留水分,再去離子水清洗。本發明提供的硅柱快速再生方法,針對PCR清潔試劑盒中或瓊脂糖膠抽提試劑盒中的硅柱進行再生和利用,可以為實驗室節約資金,為社會節約資源,是更加環保的使用硅柱的方法。
技術領域
本發明屬于生物技術領域,具體為硅柱快速再生方法。
背景技術
傳統的分子克隆方法費時費力;因此,許多實驗方法或技術被商業試劑盒取代,如1)用于PCR產物(或DNA)純化的PCR清潔試劑盒(PCR即聚合酶鏈式反應是基因或DNA擴增的主要手段),2)用于DNA酶切產物純化的瓊脂糖膠抽提試劑盒和3)質粒提取試劑盒。利用這些試劑盒加快了分子克隆的進程和研究的效率。由于試劑盒相對昂貴而且產品的設計主要是一次性使用,試劑盒的使用也耗費了許多實驗室的財力。
上述試劑盒主要由硅柱和實驗試劑組成,其核心材料是硅柱。一次性使用的試劑盒,一方面,造成大量的垃圾和環境問題,另一方面,也造成資金和資源的浪費。
發明內容
針對上述技術問題,本發明提供一種使硅柱快速再生的方法,并對再生的硅柱進行了功能鑒定。
具體技術方案為:
硅柱快速再生方法,包括以下過程:
(1)取硅柱置于收集管中,加0.75mL蒸餾水,進行離心分離,棄去收集管中廢液;
(2)向硅柱中加入硅柱再生液,靜置3分鐘進行離心分離,棄去收集管中廢液;所述的硅柱再生液為磷酸溶液;
(3)重復步驟(2)五次;
(4)用0.75mL蒸餾水,離心分離、清洗硅柱,棄去收集管中廢液;
(5)將硅柱移至無菌離心管中,離心1分鐘,除盡硅柱中殘留水分即可得到快速再生的硅柱;
以上所述的離心分離過程為采用臺式離心機中,在室溫下,以12000rpm速度離心1分鐘。
所述的磷酸溶液濃度為1mol/L。
本發明提供的硅柱快速再生方法針對PCR清潔試劑盒中或瓊脂糖膠抽提試劑盒中的硅柱進行再生和利用,可以為實驗室節約資金,為社會節約資源,是更加環保的使用硅柱的方法。
附圖說明
圖1為實施例中的標準曲線;
圖2為實施例中不同濃度的磷酸對硅柱DNA污染清除效果分析;
圖3為實施例中再生硅柱與未使用過的硅柱對DNA純化效果比較分析;
圖4為實施例中再生硅柱從瓊脂糖中回收、純化DNA效果分析;
圖5為實施例中再生硅柱多次連續使用對DNA純化效果分析;
圖6為實施例中再生硅柱與原始柱對Tbox5基因克隆比較分析。
硅柱再生具體實施方式
以下結合多個實驗和實施例說明本發明的具體技術方案。
實施步驟一、標準曲線的建立
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