[發明專利]束花石斛降血糖有效部位、有效成分及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201710430740.2
• 申請日: 2017-06-09
• 公開（公告）號: CN107320639A
• 公開（公告）日: 2017-11-07
• 發明（設計）人: 蔡金艷
• 申請（專利權）人: 廣東藥科大學
• 主分類號: A61K36/8984
• 分類號: A61K36/8984;A61P3/10;C07J71/00;A61K31/7048;A61K31/58;A23L33/105;A61K135/00
• 代理公司: 佛山幫專知識產權代理事務所(普通合伙)44387
• 代理人: 顏春艷

技術領域

本發明涉及制藥技術領域，具體涉及束花石斛降血糖有效部位、有效成分及其制備方法和應用。

背景技術

石斛，蘭科植物之一，在我國主要分布于西南、華南、臺灣等地，對人體具有曲解虛熱、益精強陰等療效，藥用價值已被世人所認可，并被廣泛使用。石斛始載于《神農本草經》，記載：“味甘、平，無毒；治傷中，除痹，下氣，補五臟虛勞，贏瘦，強陰；久服厚腸胃，輕身，延年，長肌肉，逐皮膚邪熱，定志除驚等”?！侗静菥V目拾遺》(清·趙學敏)：“清胃除虛熱，生津，已勞損，以之代茶，開胃健脾，定驚療風，能鎮炎痰，解暑，甘芳降氣等”。

石斛屬為蘭科比較大的屬之一，全球約有1000余種，我國有石斛屬植物共74種2變種，其中有藥用價值且能進行商品流通的有50余種，如束花石斛、鐵皮石斛、金釵石斛等。束花石斛(Dendrobium chrysanthum Lindl.)是《中華人民共和國藥典》收載入藥的石斛中藥材之一，味淡、性微寒，有滋陰養胃、清熱解毒的功效，在臨床上多用于治療慢性咽喉炎、眼科疾病、血栓閉塞性疾病，效果十分明顯，現是脈絡寧、通塞脈片、石斛夜光丸等著名中成藥的主要原料之一，為我國常用的傳統中藥植物，國內外需求量大。在我國主要分布在云南、廣西、貴州等省。

現有研究中，尚未有束花石斛及其制劑用于糖脂代謝紊亂防治中的研究報道。

發明內容

有鑒于此，本發明所要解決的技術問題，就是提出一種束花石斛降血糖有效部位和有效成分，其具有降血糖活性，可用于防治糖脂代謝紊亂，同時提出上述有效部位和有效成分的制備方法和應用。

為解決上述技術問題，本發明采用以下技術方案予以實現：

一種束花石斛降血糖有效部位的制備方法，包括以下步驟：

(1)以干燥束花石斛莖為原料，粉碎后用極性溶劑提取得到提取液，然后進行抽濾處理得到總浸膏；

(2)將總浸膏與水混溶，然后依次用極性由低到高的A、B、C、D四種溶劑進行梯度萃取，分別得到四種萃取部位的浸膏，其中，溶劑A為非極性溶劑，溶劑B為常用的中等偏低極性溶劑，溶劑C為中強極性溶劑，溶劑D為強極性溶劑；

(3)最后將四種萃取部位的浸膏分別進行濃縮和蒸干，得到A、B、C、D四種有效部位。

作為優選地，所述步驟(1)中提取用的極性溶劑為丙酮、甲醇、乙醇、水中的一種或多種，提取溫度為60～100℃,回流提取3-5次，每次2-4h。

作為優選地，所述步驟(2)中的溶劑A為石油醚、環己烷、苯中的一種或多種，溶劑B為三氯甲烷、乙醚、四氫呋喃中的一種或多種，所述溶劑C為乙酸乙酯，所述溶劑D為正丁醇、異丙醇中的一種或兩種。

作為優選地，上述束花石斛降血糖有效部位的制備方法具體包括以下步驟：

(1)以干燥束花石斛莖為原料，粉碎后用95％的乙醇提取得到提取液，然后進行抽濾處理得到總浸膏；

(2)將總浸膏與水按2:1混溶，然后依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇四種溶劑進行梯度萃取，分別得到四種萃取部位的浸膏；

(3)最后將四種萃取部位的浸膏分別進行濃縮和蒸干，得到石油醚有效部位、三氯甲烷有效部位、乙酸乙酯有效部位及正丁醇有效部位。

一種束花石斛降血糖有效成分的制備方法，包括如下步驟：將溶劑B萃取得到的有效部位先經200-300目的硅膠柱色譜分離，然后用極性從小到大的洗脫劑體系E和洗脫劑體系F進行梯度洗脫，TLC檢識，合并相同組分，得到各組分再反復經200-300目的硅膠柱色譜，Sephadex LH-20柱色譜及石油醚或乙酸乙酯重結晶分離純化得到化合物異紐替皂苷元和26-O-紐替皂苷元葡萄糖苷。

作為優選地，所述洗脫劑體系E為石油醚-二氯甲烷體系，所述洗脫劑體系F為二氯甲烷-甲醇體系。

作為優選地，上述束花石斛降血糖有效成分的制備方法，具體包括如下步驟：將三氯甲烷部位經過200-300目硅膠柱色譜，以硅膠作為吸附劑，石油醚-二氯甲烷、二氯甲烷-甲醇進行梯度洗脫，每1000mL為一個流分，以石油醚:二氯甲烷＝100:1、20:1、10:1、8:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1和二氯甲烷11個梯度進行第一階段洗脫，然后以二氯甲烷：甲醇＝100:1、50:1、20:1、10:1、5:1、4:1、2:1及純甲醇8個梯度進行第二階段洗脫；二氯甲烷：甲醇＝50:1的流分經200-300目硅膠柱色譜，Sephadex LH-20柱色譜及石油醚/乙酸乙酯混合重結晶分離純化得到變形螺甾烷醇類甾體皂苷：26-O-紐替皂苷元葡萄糖苷及異紐替皂苷元化合物。