[發明專利]食用菌凝集素及其在抑制棕囊藻生長中的應用

有效

• 申請號: 201710429851.1
• 申請日: 2017-06-09
• 公開（公告）號: CN107090020B
• 公開（公告）日: 2020-10-16
• 發明（設計）人: 高麗華;林勇;羅德興;高麗明;郭文杰;歐陽桐嬌
• 申請（專利權）人: 福建省平潭縣水產良種實驗有限公司
• 主分類號: C07K14/375
• 分類號: C07K14/375;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/16;C02F1/50
• 代理公司: 福州市博深專利事務所(普通合伙) 35214
• 代理人: 張明

1.一種食用菌凝集素抑制棕囊藻生長的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：取雙孢蘑菇2796子實體，按質量體積比為1:5加入0.9%w/v生理鹽水，在4℃下浸泡18h；然后用高速組織搗碎機將其均漿后再次放在4℃下浸泡4h，4層紗布過濾，棄濾渣，取濾液；在4℃，9000 r/min下冷凍離心20min，取出上清液；加入22.6%w/v硫酸銨鹽析，并用79-1磁力加熱攪拌器使其混勻，以此得到沉淀為40%的飽和溶液部分，放入到4℃下18h使其充分沉淀，取上清；再次在4℃，9000r/min下冷凍離心20min，取出上清液，加入12%w/v硫酸銨鹽析，并用79-1 磁力加熱攪拌器使其混勻，以此得到沉淀為60%的飽和溶液部分，放入到4℃下18h使其充分沉淀，在4℃，9000r/min下冷凍離心20min，取出沉淀；將沉淀溶于1mol/l的NaCl中，裝入透析袋中除鹽，用相同的鹽濃度透析至外透析液無SO₄^2-檢出為止；所得透析液聚乙二醇濃縮后上DEAE-Sepharose Fast Flow柱，以0.05mol/l，pH7.8的磷酸緩沖液PBS對含1mol/LNaCl 的同一緩沖液梯度洗脫，檢測波長280nm，分管收集，以鴿子血檢測各峰的凝血活性，收集活性峰；然后活性峰上Sephadex G-100柱層析純化，流速4ml/管，10min/管，洗脫液為 0.05 mol/l、pH8.0的PBS緩沖液，檢測波長280nm，分管收集后檢測各峰的凝血活性，收集活性峰，冷凍干燥即得所述食用菌凝集素純品；

步驟2：將步驟1得到的食用菌凝集素純品直接加入棕囊藻生長水域中，抑制其生長。