[發明專利]一種康寧木霉菌劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201710429260.4
• 申請日: 2017-06-08
• 公開（公告）號: CN107410365A
• 公開（公告）日: 2017-12-01
• 發明（設計）人: 謝克虎
• 申請（專利權）人: 青島中諾盛大生物科技有限公司
• 主分類號: A01N63/04
• 分類號: A01N63/04;A01N61/00;A01N37/44;A01P3/00;A01P5/00;A01P21/00;C09K17/32;C09K101/00
• 代理公司: 北京世譽鑫誠專利代理事務所(普通合伙)11368
• 代理人: 孫國棟

技術領域

本發明涉及一種微生物菌劑及其制備方法和應用，具體涉及一種康寧木霉菌劑及其制備方法和應用，屬于農業微生物技術領域。

背景技術

土傳病害發病規律復雜、傳播蔓延快、危害嚴重，產量損失較大，常造成土壤生態環境惡化，可周年發生。

土傳病害也是引起連作障礙最主要原因之一，作物連作為病原菌的大量繁殖提供了有利場所，加重了土傳病害的發生。

土傳病害種類較多，常見的有十字花科菌核病、軟腐病，茄果、瓜類等猝倒病、立枯病、疫病、根腐病、枯萎病和黃萎病，番茄、黃瓜和甜辣椒青枯病、根結線蟲病等。

近年來，由于連作面積的不斷擴大、用藥不科學、生產中作物種植種類單一、高密度連作栽培以及缺乏有效輪作等栽培措施的影響，致使土傳病害發展蔓延速度較快，抗性增強，作物死苗率不斷增加，從而造成作物嚴重減產，甚至絕產，品質降低，已經嚴重影響了農作物生產。

發明內容

為解決現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種操作簡單、定植力強、不會產生抗藥性、能夠有效防治土傳病害的康寧木霉菌劑及其制備方法。

為了實現上述目標，本發明采用如下的技術方案：

一種康寧木霉菌劑，其特征在于，包括：康寧木霉菌粉、氨基酸和黃腐酸鉀，其中，前述康寧木霉菌粉由保藏編號為CGMCC No.13771(拉丁文名稱為Trichoderma koningii)的康寧木霉在麥麩培養基上發酵得到。

前述的康寧木霉菌劑，其特征在于，在前述康寧木霉菌粉中，康寧木霉的孢子含量≥100億/克。

前述的康寧木霉菌劑，其特征在于，前述康寧木霉菌粉、氨基酸和黃腐酸鉀按照5：1-3：0.5-1.5的質量比例混合。

前述的康寧木霉菌劑，其特征在于，前述康寧木霉菌粉、氨基酸和黃腐酸鉀按照5：2：1的質量比例混合。

前述的康寧木霉菌劑，其特征在于，制備方法如下：

Step1：將保藏編號為CGMCC No.13771的康寧木霉接種在PDA平板培養基上，25-28℃暗培養5-10d，將培養好的平板作為原種；

Step2：將Step1培養好的原種接種在PDA液體培養基上，25-28℃、121rpm暗培養3-5d，將發酵好的液體作為種子液；

Step3：將麥麩與水按照70：25-35的質量比混勻，滅菌后作為發酵培養基；

Step4：將Step2培養好的種子液加入到Step3制得的發酵培養基中，25-28℃靜置暗培養，待孢子含量≥200億/克時停止發酵；

Step5：將Step4制得的發酵液烘干，粉碎，過篩，得到孢子含量≥100億/克的康寧木霉菌粉；

Step6：將Step5制得的康寧木霉菌粉與氨基酸和黃腐酸鉀混合。

本發明的有益之處在于：

(1)康寧木霉可以快速生長進行生態位占據，同時產生多種次生代謝產物抑制病原菌生長，經試驗驗證，本發明的康寧木霉菌劑可以有效防治草莓根腐病、黃瓜蔓枯病等土傳病害，具有非常積極的使用效果；

(2)本發明的康寧木霉菌劑，孢子含量較高，可以減少畝用量，節約成本；

(3)本發明的康寧木霉菌劑，可滴灌、可沖施、可與底肥混合使用，使用方法多樣，可根據不同情況合理使用，節約人力及使用成本；

(4)本發明的康寧木霉菌劑，可以產生多種次生代謝產物，從而可以改良土壤，促進植物生長；

(5)本發明的康寧木霉菌劑，其工藝簡單，適合工廠化生產。

具體實施方式

以下結合具體實施例對本發明作具體的介紹。

第一部分：獲取康寧木霉

1、篩選分離菌株

將從大棚采集的土樣在PDA平板上進行稀釋分離培養，挑取生長較快的菌落。

2、鑒定菌株

利用ITS序列進行分子檢測，檢測結果顯示分離得到的菌株為康寧木霉。

3、菌株保藏

我們將篩選分離得到的康寧木霉于2017年03月31日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(北京市朝陽區北辰西路1號院3號)，保藏編號為CGMCC No.13771。

第二部分：制備康寧木霉菌劑

1、培養原種

將保藏編號為CGMCC No.13771的康寧木霉接種在PDA平板培養基上，27℃暗培養7d，將培養好的平板作為原種。

2、培養種子液