[發明專利]一種酶法提取的川白芷多糖及制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710428443.4
• 申請日: 2017-06-08
• 公開（公告）號: CN107012184B
• 公開（公告）日: 2020-09-04
• 發明（設計）人: 吳衛;唐小琴;侯凱;何婧芝;何夢竹;汪麗霞;溫小冬;王齊飛
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12P19/14;C08B37/00
• 代理公司: 成都九鼎天元知識產權代理有限公司 51214
• 代理人: 錢成岑

本發明公開了一種酶法提取的川白芷多糖及其制備方法和應用。該川白芷多糖同時存在α構型和β構型多糖鏈接方式，其表觀分子量為3.93kDa；由川白芷藥材經酶法提取、醇沉除雜、去蛋白去鹽后，再經DEAE?瓊脂糖凝膠FF柱和瓊脂糖凝膠6FF凝膠柱層析分離而得。本發明所得的川白芷多糖具有良好的美白活性，對酪氨酸酶活性具有抑制作用，且隨著濃度的增加，酪氨酸酶抑制率逐漸升高，呈現明顯的量效關系。本發明方法提取川白芷多糖，酶制劑用量少、工藝簡單，生產成本低。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及一種酶法提取的川白芷多糖及制備方法和應用。

背景技術

藥材白芷為傘形科植物白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm)Benth.etHook.f.或杭白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm)Benth.et Hook.f.var.formosana(Boiss)Shan et Yuan的干燥根。白芷味辛，性溫，歸胃、大腸、肺經。具有解表散寒，祛風止痛，宣通鼻竅，燥濕止帶，消腫排膿的作用，用于感冒頭痛，眉棱骨痛，鼻塞流涕，鼻鼽，鼻淵，牙痛，帶下，瘡瘍腫痛。

白芷是衛生部公布藥食兩用的87種中藥材之一，也是我國常用的大宗藥材。按產地分為川、杭、祁、禹白芷四大商品。其中產于四川的白芷則稱川白芷，是著名的川產道地藥材，產量約占全國商品白芷的70％。川白芷以四川遂寧出產的形優、質堅、粉多香濃、色白細膩、橫切片成“菊花芯形”的川白芷品質最佳。白芷富含多種化學成分，現代研究表明，白芷的脂溶性化學成分主要為香豆素類，含量為0.211％～1.221％，其水溶性成分有棕櫚酸、豆甾醇、β-谷甾醇、β-胡蘿卜苷(β-daucosterin)等。白芷還富含多種多糖。

多糖廣泛存在于動、植物和微生物(真菌和細菌)中，常與蛋白質和多聚核苷酸相連，是生命活動中必不可少的生物大分子，在細胞吸附、細胞與細胞信息交流、免疫系統分子識別方面扮演著重要的作用。目前多糖已成為天然藥物及保健品研發中的重要組成部分。植物多糖具有多種生物活性，如抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、降血糖血脂、抗衰老、抗炎、抗轄射、免疫調節等。采用酶解法提取多糖在近年來得到了廣泛的應用。

酶解法通常是將粉碎的試驗材料懸浮于水中，根據酶作用的最適條件，調節反應液pH值和溫度，然后加入5％～25％根據提取目的和實驗室條件選用的酶，反應1～4h，除去殘渣得濾液即為多糖提取液。酶解法已在多糖保健品的制備中采用。但考慮到經濟和效率因素，多采用熱水提取法與酶法相結合的辦法，即先用熱水提取，然后殘渣再用酶法提取。

酶具有專一性，能有選擇地釋放產物，且溫度低，無污染，不易破壞多糖的生物活性。酶屬于蛋白質，它的種類，酶促反應溫度、pH、時間和底物量等都會影響酶的活性，過高或過低都會造成酶的失活，從而影響提取效率。同時酶解法因為酶制劑用量大、成本高，限制了它在多糖提取工業上的大規模應用。

目前對于白芷多糖的研究尚不夠深入。僅個別學者對杭白芷多糖的提取以及抗氧化和增強動物皮膚組織免疫功能進行過分析，且尚未開展過酶法提取的白芷多糖的結構和活性研究。

發明內容

本發明的目的之一在于針對上述問題，提供一種酶法提取的川白芷多糖。

本發明的目的之二在于提供一種酶法提取的川白芷多糖的制備方法。

本發明的目的之三在于提供一種酶法提取的川白芷多糖的應用。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：

本發明所述的一種酶法提取的川白芷多糖，該川白芷多糖同時存在α構型和β構型多糖鏈接方式，其表觀分子量為3.93kDa；由川白芷藥材經酶法提取、醇沉除雜、去蛋白去鹽后，再經DEAE-瓊脂糖凝膠FF柱和瓊脂糖凝膠6FF凝膠柱層析分離而得。

本發明所述的川白芷多糖的制備方法，具體包括以下步驟：