[發明專利]一種高效選育無花粉污染菊花的方法及應用

在審

• 申請號: 201710428255.1
• 申請日: 2017-06-08
• 公開（公告）號: CN107182772A
• 公開（公告）日: 2017-09-22
• 發明（設計）人: 滕年軍;鐘興華;華笠淳;王凡;李茜;陳發棣;房偉民;管志勇;蔣甲福;陳素梅;廖園
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/04
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司32218
• 代理人: 徐冬濤,李曉峰

1.一種高效選育無花粉污染菊花的方法，其特征在于：包括以下步驟：

(1)以無花粉污染菊花品種為母本，以花粉量少、中、多的菊花品種為父本進行人工雜交；

(2)人工授粉后統計各雜交組合中花粉在柱頭上的萌發數量；

(3)統計子房飽滿率和結實率；

(4)測定雜交F₁代散粉特性，包括單個花序管狀花數、單花花藥數、花藥含粉量、花序含粉量和表觀花粉量5個性狀，分析花粉污染程度，獲得無花粉污染菊花雜交后代。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(1)中所述無花粉污染菊花品種為花藥不含花粉或花藥壁不開裂的菊花品種；優選為花藥不含花粉的菊花品種；進一步優選的，所述花藥不含花粉的菊花品種為‘Kingfisher’、‘南農玉笏’、‘Q1-62’；所述花藥壁不開裂的菊花品種為‘QX-107’、‘南農冰激凌’、‘QX-008’。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(1)中所述的父本為花粉量少的菊花品種。

4.根據權利要求1或3所述的方法，其特征在于：所述花粉量少的菊花品種為‘諾亞’；所述花粉量中的菊花品種為‘南農紅焰’；所述花粉量多的菊花品種為‘南農菲紫’、‘南農紅橙’、‘南農銀山’。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(2)中于授粉后24h分別統計各雜交組合中花粉在柱頭上的萌發數量；步驟(3)中于授粉后8、12、18天統計子房的飽滿數和不飽滿數，計算子房飽滿率，待種子成熟，統計結實率；結實率(％)＝平均每朵花序的種子數/平均每個花序的舌狀花數×100％。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(1)中所述人工雜交的方法為：在母本舌狀花剛露色時剪去舌狀花花瓣直至可以看見里面的柱頭，但是不能碰及柱頭，并用硫酸紙袋嚴格地套袋隔離；同時將即將散粉的父本花序進行套袋隔離，觀察母本的柱頭伸出并且呈“Y”字型時，于晴天用毛筆收集父本的新鮮花粉，并將花粉輕輕地蘸在母本舌狀花雌蕊柱頭上，套袋隔離，1-2天后按上述方法再次授粉。

7.根據權利要求1或5所述的方法，其特征在于：步驟(2)中于授粉后24h收集3個花序，分別隨機挑選5個小花，立即用FAA固定，保存在4℃冰箱備用；48h以后，用1mol·L^-1NaOH溶液軟化8h，蒸餾水清洗3次，并小心地將花柱從小花中剝離出來，置于載玻片上，用膠頭滴管滴加0.1％苯胺藍溶液進行染色，隨即于熒光顯微鏡下觀察并拍照，記錄下每個雌蕊柱頭上的花粉萌發數，重復15次。

8.根據權利要求1或5所述的方法，其特征在于：步驟(3)中在人工授粉后8、12、18d隨機取5個花序，肉眼觀察子房的飽滿狀況，并統計飽滿與不飽滿數，在體視顯微鏡下拍照；待種子成熟，剪下花序，將每個組合中60個花序隨機分為3份，即為3個重復，每個重復20個花序，分別統計20個花序的舌狀花數和飽滿的種子數。