[發(fā)明專利]一種鰻敗血假單胞菌疫苗及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710425087.0
• 申請日: 2017-06-06
• 公開（公告）號: CN107693785A
• 公開（公告）日: 2018-02-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李杰;莫照蘭;劉長琳;李貴陽;陳四清
• 申請（專利權(quán)）人: 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所
• 主分類號: A61K39/104
• 分類號: A61K39/104;A61K39/39;A61P31/04;C12N1/20;C12R1/38
• 代理公司: 北京和信華成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11390
• 代理人: 胡劍輝

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的微生物學(xué)及免疫學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種鰻敗血假單胞菌疫苗及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

鰻敗血假單胞菌(Pseudomonas anguilliseptica)是海水和半咸水養(yǎng)殖魚類的重要致病菌。最初在爆發(fā)“紅點(diǎn)病”的日本鰻鱺(Anguilla japonica)中分離，是革蘭氏陰性短桿菌，菌體大小約1μm(直徑)×2—3μm(長度)。鰻敗血假單胞菌對多種淡水和半咸水魚類具有致病性，其最適感染溫度為17-21℃，在冬季水溫較低時發(fā)病頻繁，在病原假單胞菌中，鰻敗血假單胞菌對海水養(yǎng)殖魚類的威脅最大，已經(jīng)在多種養(yǎng)殖魚類中發(fā)現(xiàn)了鰻敗血假單胞菌感染的病例，包括歐洲鰻鱺(Anguilla anguilla)，黑鯛(Acanthopagrus schlegeli)，香魚(Plecoglossus altivelis)，大西洋鮭(Salmo salar)，海鱒(Salmo trutta)，虹鱒(Oncorhynchus mykiss)，白鮭(Coregonus sp.)，大西洋鯡(Clupea harengus)，點(diǎn)帶石斑魚(Epinephelus coioides)，金頭鯛seabream(Sparus aurata)，大西洋鱈(Gadus morhua)，大菱鲆(Psetta maxima)和牙鲆 (Paralichthys olivaceus)。該菌呈世界性分布，普遍存在于半咸水和海水環(huán)境中，主要分布在法國、西班牙、葡萄牙、蘇格蘭、芬蘭、荷蘭、丹麥、日本、韓國等國家和地區(qū)，在我國的臺灣省也有該病原感染的病例，但大陸地區(qū)罕見該病原報道，可能由于該菌在普通培養(yǎng)基上生長十分緩慢，在2216e平板培養(yǎng)基上，鰻敗血假單胞菌生長周期為2-4周，不易觀察。由于該菌生長代謝速度較慢，且存在胞外莢膜等結(jié)構(gòu)，采用抗生素和化學(xué)藥物等方法進(jìn)行預(yù)防或治療效果不明顯，反而會帶來病原的耐藥性、藥物殘留、食品安全及環(huán)境污染等諸多問題，發(fā)展疫苗免疫技術(shù)為基礎(chǔ)的綜合防控技術(shù)體系將是該病原防治的重要手段。

鰻敗血假單胞菌主要存在2種O血清型亞群：來自鰻魚的菌株及來自金鯛、大菱鲆、海鯛的菌株，RAPD的遺傳學(xué)將鰻敗血假單胞菌分為2種基因型,與2種O抗原血清型一致(López-Romalde et al.2003)。鰻敗血假單胞菌的疫苗研究相對較少，只在牙鲆、大菱鲆和海鯛中有過相應(yīng)的報道，2005 年，西班牙的Romalde等利用鰻敗血假單胞菌水化疫苗對大菱鲆進(jìn)行了免疫， 6周和12周的免疫保護(hù)率分別為90％和78％，Romalde等同時進(jìn)行了海鯛的規(guī)模化免疫研究，免疫的海鯛在養(yǎng)成期間死亡率為0.06％，低于未免疫組的 1.42％(Romalde等，2005)。韓國的Jang等制備了鰻敗血假單胞菌疫苗對牙鲆進(jìn)行免疫，在17℃和20℃下，4周的免疫保護(hù)率分別為69％和89％(Jang et al.,2014)。目前國際上尚無商品化的鰻敗血假單胞菌疫苗產(chǎn)品，且已報道研究所用疫苗皆為滅活菌體的PBS重懸水化疫苗，而商品化滅活疫苗多為油乳化疫苗，水化疫苗由于抗原易降解、疫苗保質(zhì)期短和免疫保護(hù)期短，一般不作為商品化疫苗產(chǎn)品使用。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決現(xiàn)有疫苗適配性差穩(wěn)定性差的問題，我們提出了一種鰻敗血假單胞菌疫苗及其應(yīng)用。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：