[發(fā)明專(zhuān)利]一種促骨骼細(xì)胞發(fā)育型螯合鈣的制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710424743.5
• 申請(qǐng)日: 2017-06-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107184950A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 雷國(guó)慶;王艷芹
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 常州豪坦商貿(mào)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A61K38/01
• 分類(lèi)號(hào): A61K38/01;A61P3/14;A61P19/08;A61P19/10;A61K33/06;A61K36/46
• 代理公司: 北京風(fēng)雅頌專(zhuān)利代理有限公司11403
• 代理人: 馬驍

1.一種促骨骼細(xì)胞發(fā)育型螯合鈣的制備方法，其特征在于具體制備步驟為：

（1）按質(zhì)量比1:5，將三七葉片與杜仲葉片混合并研磨過(guò)150目，得混合球磨顆粒，按質(zhì)量比1:10，將混合球磨顆粒與去離子水混合，水浴加熱并離心分離，收集上層清液并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得濃縮液，按體積比1:8，將濃縮液與無(wú)水乙醇混合，攪拌并靜置陳化，過(guò)濾得濾液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干得干燥提取物，取1～2g干燥提取物、0.1～0.2mL吐溫-80、85～100mLDMEM細(xì)胞培養(yǎng)液攪拌混合并滅菌處理，得改性混合液；

（2）取新鮮牛骨并研磨過(guò)20目篩，得牛骨顆粒并洗滌干燥，煅燒后碾磨并過(guò)200目篩，得煅燒牛骨粉末，按質(zhì)量比1:10，將煅燒牛骨粉末與質(zhì)量分?jǐn)?shù)1％磷酸氫二銨溶液混合，超聲分散后靜置，過(guò)濾得濾餅，得活化煅燒顆粒；

（3）按質(zhì)量比1:5，將膠原蛋白與質(zhì)量分?jǐn)?shù)1％磷酸氫二銨溶液混合，攪拌得膠原蛋白混合液，按質(zhì)量比1:25，將胰蛋白酶添加至膠原蛋白混合液中，攪拌混合并調(diào)節(jié)pH至8.0，水浴加熱制備得酶解混合液；

（4）按重量份數(shù)計(jì)，分別稱(chēng)量45～50份酶解混合液、25～30份活化煅燒顆粒和15～20份改性混合液置于燒杯中，攪拌混合并加熱至沸騰，保溫加熱后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，碾磨并過(guò)80目篩，即可制備得一種促骨骼細(xì)胞發(fā)育型螯合鈣。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促骨骼細(xì)胞發(fā)育型螯合鈣的制備方法，其特征在于：步驟（2）所述的牛骨顆粒煅燒溫度為550～600℃。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促骨骼細(xì)胞發(fā)育型螯合鈣的制備方法，其特征在于：步驟（3）所述的調(diào)節(jié)pH采用的是質(zhì)量分?jǐn)?shù)5％碳酸氫鈉溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促骨骼細(xì)胞發(fā)育型螯合鈣的制備方法，其特征在于：步驟（4）所述的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為75～80℃。