[發明專利]一種用于紅富士蘋果授粉花粉懸浮液的制備方法

在審

• 申請號: 201710424731.2
• 申請日: 2017-06-07
• 公開（公告）號: CN107312741A
• 公開（公告）日: 2017-11-03
• 發明（設計）人: 陸娜;薛洋;葛明月
• 申請（專利權）人: 常州瑞坦商貿有限公司
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04
• 代理公司: 北京風雅頌專利代理有限公司11403
• 代理人: 馬驍

技術領域

本發明涉及一種用于紅富士蘋果授粉花粉懸浮液的制備方法，屬于果樹授粉技術領域。

背景技術

蘋果大多自花不育，需異花授粉，果實由子房和花托發育而成。植物自交不親和性是被子植物中普遍存在的限制自花受精的機制，它阻止基因型相同的花粉管在雌蕊中正常生長，完成受精。該反應涉及到70多個科，250多個屬。自交不親和的發生防止了近親繁殖、促進異花授粉受精，有利于物種多樣性。根據其控制因子的不同，自交不親和的類型可分為孢子體型和配子體型。配子體自交不親和性是指在花粉和雌蕊的相互作用過程中，花粉的行為決定于花粉粒內壁蛋白的性質，也就是由花粉粒本身的單倍體基因型決定的，薇科多種果樹如梨、蘋果、甜櫻桃、杏、果梅、李和扁桃等表現出配子體型自交不親和性。自交不親和現象在一定程度上推動了物種的進化，但是在經濟作物的生產中比如蘋果生產中也造成了一定的障礙。由于這些果樹自花授粉不能結實，在生產上必須配置授粉品種，或進行人工輔助授粉才能保證座果，從而增加了生產成本。

目前，克服自交不親和的方法一般可歸為生物學方法、物理學方法和化學處理法三大類。其中化學處理法一般是在蘋果花期噴施3～10%的NaCl溶液，NaCl的濃度與自交不親和的程度有關，但是這會導致花粉會出現不同程度的皺縮而無法萌發，影響花粉的活性，使得蘋果的結果率會非常低，嚴重影響果園的產量和效益。因此，迫切尋找一種不影響花粉的活性，提高花粉的座果率的授粉花粉懸浮液。

發明內容

本發明所要解決的技術問題：針對傳統的蘋果授粉方法影響花粉的活性，導致花粉出現不同程度的皺縮而無法萌發，降低了蘋果的座果率，嚴重影響果園的產量和效益的問題，提供了一種用于紅富士蘋果授粉花粉懸浮液的制備方法。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：

一種用于紅富士蘋果授粉花粉懸浮液的制備方法，其特征在于具體制備步驟為：

（1）在珊夏蘋果樹處于花期時，選取花朵和花蕾并采摘，在避光環境中收集珊夏蘋果花粉，將珊夏蘋果花粉置于白熾燈下干燥，將干燥后花粉過篩除雜，收集除雜后的花粉，并裝入無菌離心管中，置于4℃的環境下避光保存；

（2）按重量份數計，分別稱取50～60份蔗糖、5～7份乳糖、10～20份葡萄糖、0.01～0.03份維生素C、0.1～0.3份硼酸、0.02～0.04份硫酸鎂、0.01～0.03份硝酸鉀、0.01～0.03份硝酸鈣加入到900～1000份去離子水中，攪拌混合后滅菌，滅菌后得液體培養基；

（3）將除雜后避光保存的花粉加入液體培養基中，攪拌后置于培養箱中，在黑暗環境下培養，得到花粉培養液，放入低溫冰箱中儲存，儲存后取出解凍，得解凍液；

（4）按重量份數計，分別選取100～120份解凍液、10～15份蔗糖、0.02～0.04份硼酸、0.001～0.003份硫酸鋅，攪拌后得珊夏蘋果花粉萌發液；

（5）將阿拉伯膠溶液和珊夏蘋果花粉萌發液混合，即可得用于紅富士蘋果的授粉花粉懸浮液。

步驟（1）中所述的白熾燈的功率為25～30W。

步驟（1）中所述除雜后保存的花粉和液體培養基的質量比為1:1000。

步驟（3）中所述的培養箱溫度為20～25℃，培養時間為5～7h。

步驟（3）中所述的低溫冰箱溫度為-15～-10℃。

步驟（3）中所述的解凍溫度為5～8℃。

步驟（5）中所述的阿拉伯膠溶液和珊夏蘋果花粉萌發液是按質量比1:10混合。

本發明與其他方法相比，有益技術效果是：

（1）本發明將收集得到的珊夏蘋果花粉，通過培養法培養珊夏蘋果花粉，在離體培養環境中，培養基承擔起柱頭和花柱的功能，通過培養，可以提高珊夏蘋果花粉的原本的活性和萌發率；

（2）本發明將培養得到的花粉培養液進行冷凍保存，保存的目的是為了將花粉萌發率降到最低值，為后續花粉的萌發率和花粉管的伸長做準備，可以提高花粉的敏感度；

（3）本發明將培養得到的花粉培養液中添加硼酸、蔗糖、硫酸鋅，給花粉培養提供碳源，加入硼酸是提升花粉細胞內部的代謝和吸收蔗糖的過程，能夠加快珊夏蘋果花粉萌發和花粉管伸長，使花粉的萌發率得到提高；

（4）本發明選取最有利于紅富士花粉萌發和生長的懸浮液配方和溫度，制備的用于紅富士蘋果授粉花粉懸浮液不會影響花粉的活性，易于花粉萌發，提高了紅富士蘋果的座果率。

具體實施方式