[發明專利]超臨界流體技術制備軟組織去細胞基質的方法

在審

• 申請號: 201710412419.1
• 申請日: 2017-06-02
• 公開（公告）號: CN107164298A
• 公開（公告）日: 2017-09-15
• 發明（設計）人: 曾晨光;梁麗金;楊習鋒;全大萍
• 申請（專利權）人: 廣州新誠生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371
• 代理人: 吳開磊

1.一種軟組織去細胞基質的制備方法，其特征在于，該方法包括：使用超臨界流體技術制備軟組織去細胞基質，所述軟組織為天然軟組織，所述天然軟組織包括小腸組織，血管組織，肌肉組織，心臟組織，瓣膜組織，肺組織，脾臟組織，腎臟組織，肝臟組織，胃組織，膽囊組織，脂肪組織，軟骨組織，氣管組織，食道組織，膀胱組織，輸尿管組織，輸卵管組織或子宮組織。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，該方法具體包括預處理，消毒，去細胞，漂洗和滅菌步驟。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述預處理為在4-10℃條件下，除去所述軟組織中的雜質組織，洗凈待用。

4.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述消毒為用過氧乙酸溶液、乙醇溶液和新潔爾滅中的一種振蕩浸泡或幾種混合后振蕩浸泡經過預處理的軟組織，再用生理鹽水或磷酸鹽緩沖溶液或去離子水漂洗至pH為中性。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述過氧乙酸溶液的濃度為0.01-0.1wt％；所述乙醇溶液的濃度為1-10％；所述新潔爾滅的濃度為0.05-1wt％；所述浸泡時間為0.5-24h。

6.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述去細胞和漂洗均采用超臨界CO₂流體處理。

7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述去細胞步驟的流體處理的條件為：處理的時間為0.5-24h，處理的壓強為8-40MPa，處理的溫度為33-40℃，處理后的泄壓速度為0.1-1MPa/min。

8.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述去細胞步驟的流體處理過程中加入甲醇、無水乙醇、三氟乙醇和丙酮中的一種或多種極性溶劑作為夾帶劑，所述夾帶劑體積為所述軟組織總體積的1-100倍。

9.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述漂洗步驟的流體處理的條件為：處理的時間為6-48h，處理的壓強為8-40MPa，處理的溫度為33-40℃，處理后的泄壓速度為0.1-1MPa/min；所述漂洗步驟的流體處理過程中加入濃度為0.5-10wt％的三羥甲基氨基甲烷溶液或無水乙醇作為夾帶劑，夾帶劑的體積為組織體積的1-100倍。

10.如權利要求1至9任一項所述的方法制備的軟組織去細胞基質。