[發明專利]菜籽蛋白?殼聚糖納米顆粒的掃頻超聲波制備方法

在審

• 申請號: 201710411623.1
• 申請日: 2017-06-05
• 公開（公告）號: CN107298773A
• 公開（公告）日: 2017-10-27
• 發明（設計）人: 任曉鋒;陳環;侯婷;張熙;梁秋芳;朱文靜;馬海樂;鐘永梅;王彤;王麗;田雨;劉堯剛;王志榮
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: C08L5/08
• 分類號: C08L5/08;C08L89/00;C08K5/132;C08J3/28;C08J3/24;B82Y30/00;B82Y40/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.油菜籽活性蛋白-殼聚糖復合納米顆粒，其特征在于是由以下重量份的原料制備而成：

油菜籽活性蛋白：2～10份；

殼聚糖：1～2.5份。

2.根據權利要求1所述的油菜籽活性蛋白-殼聚糖復合納米顆粒，其特征在于由以下重量份的原料制備而成：

油菜籽活性蛋白：5份；

殼聚糖： 2份。

3.根據權利要求1或2所述的油菜籽活性蛋白-殼聚糖復合納米顆粒，其特征在于其中所述的殼聚糖分子量為10萬道爾頓或者15萬-30萬道爾頓。

4.根據權利要求1或2所述的油菜籽活性蛋白-殼聚糖復合納米顆粒，其特征在于其中所述的油菜籽活性蛋白按照下述步驟進行制備：

（1）脫脂后的油菜籽餅粕采用粉碎機粉碎后過60篩，按照料液比1:10（mg/ml）加入蒸餾水；調pH到4，在室溫下攪拌2 h，4℃溫度下經10000 r/min離心20 min，留離心殘渣；

（2）將離心殘渣按照料液比1:10（mg/ml）加入蒸餾水；調pH到12，于室溫下攪拌1 h，同時進行多頻模式超聲處理，超聲處理結束后于4℃溫度下經10000 r/min離心20 min，保留上清液，

（3）將上清液pH調到4，充分攪拌后靜置30 min；4℃溫度下經10000 r/min離心20 min，收集沉淀，然后將沉淀按照料液比1:10（mg/ml）的比例用pH=4的蒸餾水清洗兩次，經冷凍干燥獲得菜籽活性蛋白粉末。

5.根據權利要求4所述的油菜籽活性蛋白-殼聚糖復合納米顆粒，其特征在于其中步驟（2）中所述的多頻超聲處理模式為：三頻或者雙頻或者單頻同步超聲處理，超聲功率密度80~120 W/L；超聲脈沖工作時間10 s；脈沖間歇時間3 s，超聲處理時間為1h。

6.根據權利要求4所述的油菜籽活性蛋白-殼聚糖復合納米顆粒，其特征在于其中步驟（2）中三頻或者雙頻或者單頻同步超聲處理的超聲波頻率組合為：20kHz、35 kHz、35/40 kHz或者20/35/40 kHz，優選20/35/40 kHz。

7.根據權利要求1或2所述的油菜籽活性蛋白-殼聚糖復合納米顆粒的制備方法，其特征在于按照下述步驟進行：

（1）將油菜籽活性蛋白溶解到蒸餾水中，磁力攪拌的同時調節pH=12，至蛋白完全溶解；得到油菜籽活性蛋白濃度為（2-10）mg／mL溶液；

（2）將殼聚糖溶解到0.1M乙酸水溶液中，得到殼聚糖溶液濃度為（1-2.5）mg／mL溶液；

（3）將步驟（2）殼聚糖溶液按體積比為1:1比例逐滴加入到步驟（1）油菜籽活性蛋白溶液中，使得油菜籽活性蛋白和殼聚糖的質量比例為：（2～10）：（1～2.5），然后調節混合溶液的pH=4-5；

（4）將步驟（3）得到的混合溶液進行雙頻掃頻超聲波處理，雙頻掃頻超聲處理時固定上下板間距為10cm，掃頻周期300s，間歇比1:1.2（超聲10s，間歇12s），上下每塊振板功率為600W；

（5）超聲結束后，室溫下靜置6h，即得油菜籽活性蛋白-殼聚糖復合納米顆粒溶液，噴霧干燥或者冷凍干燥后得油菜籽活性蛋白-殼聚糖復合納米顆粒。

8.根據權利要求7所述的油菜籽活性蛋白-殼聚糖復合納米顆粒的制備方法，其特征在于其中步驟（3）中優選調節混合溶液的pH=5；

其中步驟（3）中所述的使得油菜籽活性蛋白和殼聚糖的質量比例優選為5：2；

其中步驟（4）中所述的雙頻頻率組合為： 33 kHz/ 68kHz、33kHz/40kHz、33 kHz/28 kHz；最優選佳頻率組合為33 kHz/68 kHz。