[發(fā)明專利]一種抗體偶聯(lián)載藥納米粒子的制備方法

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• 申請日: 2017-06-05
• 公開（公告）號: CN107184990A
• 公開（公告）日: 2017-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 雷建都;劉刻峰;何靜
• 申請（專利權(quán)）人: 北京林業(yè)大學(xué)
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K47/68;A61K47/60;A61K31/4745;A61K31/09;A61P35/00
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1.一種抗體偶聯(lián)載藥納米粒子的制備方法，其結(jié)構(gòu)特征在于：所述的兩親性高分子載體材料是由親水性的馬來酰胺修飾的羧基聚乙二醇與疏水性小分子抗癌藥物紫檀芪結(jié)合形成。

2.一種制備權(quán)利要求1所述的抗體偶聯(lián)載藥納米粒子的制備方法步驟如下：

(1) 兩親性高分子載體材料聚乙二醇-紫檀芪結(jié)合物的制備：以紫檀芪為原料，在N₂保護(hù)下，將紫檀芪、聚乙二醇溶于有機(jī)溶劑中，0°C下加入有機(jī)堿作為催化劑反應(yīng)1小時，然后移至室溫下反應(yīng)24 h；待反應(yīng)結(jié)束后，磷酸緩沖鹽溶液(PBS)透析6 h，過濾冷凍干燥，然后得到純度95%以上的聚乙二醇-紫檀芪結(jié)合物；

(2) 載藥納米粒子的制備: 將(1)所述的聚乙二醇-紫檀芪結(jié)合物與10-羥基喜樹堿溶于二甲基亞砜(DMSO)中，然后逐滴加入到攪拌的水溶液中自組裝形成聚乙二醇-紫檀芪/10-羥基喜樹堿載藥納米粒子；PBS透析3h，濾膜過濾后，冷凍干燥；

(3) 利用還原劑打開抗體分子間的二硫鍵，得到含游離巰基的抗體分子；

(4) 含有游離巰基的抗體分子與聚乙二醇-紫檀芪/10-羥基喜樹堿載藥納米粒子利用硫醚鍵連接，透析過濾得到抗體修飾的靶向納米藥物載體粒子。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述抗體偶聯(lián)載藥納米粒子額制備方法，其特征在于，所述的有機(jī)溶劑為二氯甲烷(DCM)、DMSO中的一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述抗體偶聯(lián)載藥納米粒子的制備方法，其特征在于，所述的聚乙二醇為馬來酰胺修飾的羧基聚乙二醇，分子量為7500道爾頓。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述抗體偶聯(lián)載藥納米粒子的制備方法，其特征在于，所述的有機(jī)堿為可溶于水的碳二亞胺(EDC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述抗體偶聯(lián)載藥納米粒子的制備方法，其特征在于，所述的有機(jī)堿EDC和DMAP與紫檀芪的摩爾比分別為1:1和1:2。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述抗體偶聯(lián)載藥納米粒子的制備方法，其特征在于，所述的的透析袋截留分子量為7,500 道爾頓。

8.根據(jù)權(quán)利要求2所述抗體偶聯(lián)載藥納米粒子的制備方法，其特征在于，所述的的還原劑為三(2-羧乙基)膦(TECP)、二硫蘇糖醇(DTT)的一種。

9.根據(jù)權(quán)利要求2所述抗體偶聯(lián)載藥納米粒子的制備方法，其特征在于，所述的兩親性高分子載體材料具有核殼雙層結(jié)構(gòu)，外層為親水性的聚乙二醇，內(nèi)層為疏水藥物分子包裹層。