[發明專利]一種喹諾酮類藥物的檢測方法

在審

• 申請號: 201710410443.1
• 申請日: 2017-06-03
• 公開（公告）號: CN107121428A
• 公開（公告）日: 2017-09-01
• 發明（設計）人: 陳彤;阮健;于海洲
• 申請（專利權）人: 煙臺市食品藥品檢驗檢測中心
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種較大范圍，具體是一種喹諾酮類藥物的檢測方法。

背景技術

喹諾酮類（4-quinolones），又稱吡酮酸類或吡啶酮酸類，是人工合成的含4-喹諾酮基本結構的抗菌藥。喹諾酮類以細菌的脫氧核糖核酸（DNA）為靶，妨礙DNA回旋酶，進一步造成細菌DNA的不可逆損害，達到抗菌效果。

喹諾酮類和其他抗菌藥的作用點不同，它們以細菌的脫氧核糖核酸（DNA）為靶。細菌的雙股DNA扭曲成為袢狀或螺旋狀（稱為超螺旋），使DNA形成超螺旋的酶稱為DNA回旋酶，喹諾酮類妨礙此種酶，進一步造成細菌DNA的不可逆損害，而使細菌細胞不再分裂。它們對細菌顯示選擇性毒性。當前，一些細菌對許多抗生素的耐藥性可因質粒傳導而廣泛傳布。本類藥物則不受質粒傳導耐藥性的影響，因此，本類藥物與許多抗菌藥物間無交叉耐藥性。

喹諾酮類是主要作用于革蘭陰性菌的抗菌藥物，對革蘭陽性菌的作用較弱（某些品種對金黃色葡萄球菌有較好的抗菌作用）。

喹諾酮按發明先后及其抗菌性能的不同，分為一、二、三、四代。第一代喹諾酮類，只對大腸桿菌、痢疾桿菌、克雷白桿菌、少部分變形桿菌有抗菌作用。具體品種有萘啶酸（Nalidixic acid）和吡咯酸（Piromidic acid）等，因療效不佳現已少用。第二代喹諾酮類，在抗菌譜方面有所擴大，對腸桿菌屬、枸櫞酸桿菌、綠膿桿菌、沙雷桿菌也有一定抗菌作用。吡哌酸是國內主要應用品種。此外尚有新惡酸（Cinoxacin）和甲氧惡喹酸（Miloxacin），在國外有生產。第三代喹諾酮類的抗菌譜進一步擴大，對葡萄球菌等革蘭陽性菌也有抗菌作用，對一些革蘭陰性菌的抗菌作用則進一步加強。本類藥物中，國內已生產諾氟沙星。尚有氧氟沙星（Ofloxacin）、培氟沙星（Perfloxacin）、依諾沙星（Enoxacin）、環丙沙星（Ciprofloxacin）等。本代藥物的分子中均有氟原子。因此稱為氟喹諾酮。第四代喹諾酮類與前三代藥物相比在結構上修飾，結構中引入8-甲氧基，有助于加強抗厭氧菌活性，而C-7位上的氮雙氧環結構則加強抗革蘭陽性菌活性并保持原有的抗革蘭陰性菌的活性，不良反應更小，但價格較貴。對革蘭陽性菌抗菌活性增強，對厭氧菌包括脆弱擬桿菌的作用增強，對典型病原體如肺炎支原體、肺炎衣原體、軍團菌以及結核分枝桿菌的作用增強。多數產品半衰期延長，如加替沙星與莫昔沙星。

本類藥物的不良反應主要有：①胃腸道反應：惡心、嘔吐、不適、疼痛等；②中樞反應：頭痛、頭暈、睡眠不良等，并可致精神癥狀；③由于本類藥物可抑制γ-氨基丁酸（GABA）的作用，因此可誘發癲癇，有癲癇病史者慎用；④本類藥物可影響軟骨發育，孕婦、未成年兒童應慎用；⑤可產生結晶尿，尤其在堿性尿中更易發生；⑥大劑量或長期應用本類藥物易致肝損害。

喹諾酮類藥物被廣泛用于人和動物疾病的治療，由于喹諾酮類藥物在動物機體組織中的殘留，人食用動物組織后喹諾酮類抗生素就在人體內殘留蓄積，造成人體疾病對該藥物的嚴重耐藥性，影響人體疾病的治療，俗話說的好，是藥三分毒，長期攝入含有喹諾酮類藥物的動物源食品，對人體有百害而無一利。

人類長期食用含較低濃度QNs藥物的動物性食品、中成藥保健食品等，容易誘導耐藥性的傳遞，從而影響該類藥物的臨床療效。因此，喹諾酮類藥物殘留問題越來越引起人們的關注。聯合國糧農組織/世界衛生組織食品添加劑專家聯席委員會、歐盟都已制定了多種喹諾酮類藥物在動物組織中的最高殘留限量。美國FDA于2005年宣布禁止用于治療家禽細菌感染的抗菌藥物恩諾沙星的銷售和使用 。

我國也于2002年規定了環丙沙星、單諾沙星、恩諾沙星、沙拉沙星、二氟沙星、惡喹酸和氟甲喹等7種QNs藥物在動物肌肉組織中的最高殘留限量為10～500μg/kg。喹諾酮類藥物在動物組織中的殘留分析方法主要有酶聯免疫吸附測定法( EL ISA)、高效液相色譜法(HPLC) 和液相色譜2質譜分析法(LC2MS)。

因此，快速檢測喹諾酮類抗菌素成為社會的迫切需求。

發明內容

本發明的目的在于提供一種喹諾酮類藥物的檢測方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種喹諾酮類藥物的檢測方法，包括以下步驟：

（1）預處理：向待測樣品中加入1-3ml的二氯甲烷，振搖4-6分鐘，靜置5-10分鐘，收集下層萃取液；向所述萃取液中加入濃度為0.0004 mol/L-1.2mol/L的鹽酸溶液，振搖4-6分鐘，靜置5-10分鐘，收集上層液體，得到待測樣品預處理液；