[發明專利]一種通過酶解法檢測雙殼類生物軟組織中微塑料含量的方法

在審

• 申請號: 201710408710.1
• 申請日: 2017-06-02
• 公開（公告）號: CN107389852A
• 公開（公告）日: 2017-11-24
• 發明（設計）人: 隋延鳴;周凱;來琦芳;么宗利;劉一萌;高鵬程
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院東海水產研究所
• 主分類號: G01N31/10
• 分類號: G01N31/10
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所31233
• 代理人: 黃志達,魏峯

1.一種通過酶解法檢測雙殼類生物軟組織中微塑料含量的方法，包括：

(1)采集正常生命狀態的雙殼類生物，清洗后制成軟組織樣品；

(2)配制酶解液；將2-10g的軟組織樣品置于活力為8.4uhb/ml-16.8uhb/ml酶解液中50-60℃消解12-24h，得到軟組織消解液；對軟組織消解液進行真空過濾，過濾完成后干燥，通過立體顯微鏡進行計數，計算得出微塑料含量。

2.根據權利要求1所述的一種通過酶解法檢測雙殼類生物軟組織中微塑料含量的方法，其特征在于：所述步驟(1)中的雙殼類生物為生長年限不少于1年的成熟個體。

3.根據權利要求1所述的一種通過酶解法檢測雙殼類生物軟組織中微塑料含量的方法，其特征在于：所述步驟(1)中的雙殼類生物預先在-20℃環境下冷凍，在使用前室溫下解凍至少2小時。

4.根據權利要求1所述的一種通過酶解法檢測雙殼類生物軟組織中微塑料含量的方法，其特征在于：所述步驟(2)中的酶解液所用的酶為corolase7089。

5.根據權利要求1所述的一種通過酶解法檢測雙殼類生物軟組織中微塑料含量的方法，其特征在于：所述步驟(2)中的真空過濾采用0.8μm硝酸纖維濾膜或1.6μm玻璃纖維濾膜。

6.根據權利要求1所述的一種通過酶解法檢測雙殼類生物軟組織中微塑料含量的方法，其特征在于：所述步驟(2)中的干燥溫度為60-80℃，干燥時間為24-36h。

7.根據權利要求1所述的一種通過酶解法檢測雙殼類生物軟組織中微塑料含量的方法，其特征在于：所述步驟(2)中的計算方法為：得到微塑料計數數量后將微塑料計數數量減去空白對照中微塑料數量，得實際微塑料含量；除以軟組織重量，得每單位重量中微塑料含量，公式即為(計數數量值-空白值)/軟組織重量；將多個平行重復實驗中得到的數據進行整理，去除偏差較大的數據，得到平均值作為最終微塑料含量。

8.根據權利要求1所述的一種通過酶解法檢測雙殼類生物軟組織中微塑料含量的方法，其特征在于：操作人員在制備過程中穿棉質非人工紡織材質服裝。

9.根據權利要求1所述的一種通過酶解法檢測雙殼類生物軟組織中微塑料含量的方法，其特征在于：消解及干燥過程中，盛放樣品的容器密封保存。