[發(fā)明專(zhuān)利]雞傳染性鼻炎亞單位疫苗及其制備方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710406122.4 | 申請(qǐng)日: | 2016-07-28 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN107266538B | 公開(kāi)(公告)日: | 2020-09-11 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 王宏俊;李淑芳;陳小玲;張培君;龔玉梅;李桂萍 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: | 北京市農(nóng)林科學(xué)院 |
| 主分類(lèi)號(hào): | C07K14/285 | 分類(lèi)號(hào): | C07K14/285;C12N15/31;A61K39/102;A61P31/04 |
| 代理公司: | 北京海虹嘉誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11129 | 代理人: | 吳泳歷 |
| 地址: | 100097 *** | 國(guó)省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 傳染性 鼻炎 單位 疫苗 及其 制備 方法 | ||
1.一種副雞禽桿菌免疫保護(hù)性抗原蛋白,其特征在于,其氨基酸序列選自Seq IDNo.17,18,19和20之一。
2.編碼權(quán)利要求1所述的副雞禽桿菌免疫保護(hù)性抗原蛋白的基因。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基因,其特征在于,其核苷酸序列選自Seq ID No.22,23,24和25之一。
4.一種構(gòu)建體,其特征在于,包含權(quán)利要求2或3所述的基因。
5.一種重組菌,其特征在于,是由權(quán)利要求4所述的構(gòu)建體轉(zhuǎn)化宿主菌而得。
6.一種雞傳染性鼻炎亞單位疫苗,其特征在于,其免疫活性組分包括權(quán)利要求1所述的副雞禽桿菌免疫保護(hù)性抗原蛋白。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的雞傳染性鼻炎亞單位疫苗,其特征在于,所述副雞禽桿菌免疫保護(hù)性抗原蛋白的終濃度為5-100μg/ml。
8.一種雞傳染性鼻炎亞單位疫苗的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)構(gòu)建權(quán)利要求1所述的副雞禽桿菌免疫保護(hù)性抗原蛋白的表達(dá)載體;
(2)用所述表達(dá)載體轉(zhuǎn)化與之匹配的蛋白表達(dá)系統(tǒng),得到重組菌;
(3)培養(yǎng)所述重組菌,誘導(dǎo)表達(dá)獲得副雞禽桿菌免疫保護(hù)性抗原蛋白并純化蛋白;
(4)將純化后的副雞禽桿菌免疫保護(hù)性抗原蛋白與輔助試劑混合,調(diào)節(jié)所述抗原蛋白的終濃度為5-100μg/ml,得到雞傳染性鼻炎亞單位疫苗。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于,所述表達(dá)載體選自pET、pQE和pGEX系列的載體;所述蛋白表達(dá)系統(tǒng)選自大腸桿菌BL21、DH5ɑ、Top10和JM109菌株;所述輔助試劑包括免疫增強(qiáng)劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、鹽溶液和/或蒸餾水。
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