[發明專利]甜瓜抗白粉病相關SSR標記及其應用有效
| 申請號： | 201710405403.8 | 申請日： | 2017-06-01 |
| 公開（公告）號： | CN107164481B | 公開（公告）日： | 2022-12-13 |
| 發明（設計）人： | 付秋實;王懷松;呂建春 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院蔬菜花卉研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京知本村知識產權代理事務所(普通合伙) 11039 | 代理人： | 劉江良 |
| 地址： | 100081 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 甜瓜 白粉病 相關 ssr 標記 及其 應用 | ||
1.檢測甜瓜白粉病抗性分子標記的引物對，其特征在于，所述引物對序列如下：
SSR168167-F ：GTCTTCATTGCCTTCCTCGTC
SSR168167-R ：CATTCGTATTCTTACTCCCT。
2.權利要求1所述的引物對在篩選甜瓜抗白粉病種質資源中的應用，其步驟如下：
（1）采用所述引物對待選甜瓜品種的基因組DNA分別進行PCR擴增，
（2）對擴增結果進行非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測；
（3）從檢測結果中選出擴增出抗白粉病特征條帶的材料。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述PCR反應體系為: 7.5ng DNA，正向和反向引物各50ng，5μL Go Taq? Green Master Mix，加雙蒸水至10ul。
4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述PCR擴增程序為：94℃預變性4分鐘；94℃變性15秒，55℃退火15秒，72℃延伸30秒，35個循環；72℃保溫5分鐘，4℃保存。
5.根據權利要求2～4任一所述的應用，其特征在于：所述凝膠電泳檢測：指采用8％的非變性聚丙烯酰胺凝膠，點樣時使用1.5ul 750bp Marker，于150V恒功率電泳分離75min，最后銀染顯色。
6.權利要求1所述的引物對在鑒定甜瓜抗白粉病的方法，其步驟如下：
（1）采用所述引物對待測甜瓜品種的基因組DNA進行PCR擴增，
（2）對擴增結果進行非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測；
（3）根據擴增條帶的有無確定待測甜瓜品種對白粉病的抗性。
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