[發(fā)明專利]一種羅非魚皮膠原蛋白復(fù)合再生纖維修復(fù)材料的制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201710404915.2
• 申請日: 2017-06-01
• 公開（公告）號: CN107158459A
• 公開（公告）日: 2017-09-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王吉鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 合肥創(chuàng)沃科技有限公司
• 主分類號: A61L27/24
• 分類號: A61L27/24;A61L27/20;A61L27/54;A61L27/56;A61L27/58;D01F1/10;D01F2/00
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于組織修復(fù)材料制備技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種羅非魚皮膠原蛋白復(fù)合再生纖維修復(fù)材料的制備方法。

背景技術(shù)

纖維素作為天然的生物高聚物，具有生物可降解性、生物相容性以及獨(dú)特的物理、化學(xué)和機(jī)械性能，已成為新型生物醫(yī)學(xué)材料領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。而現(xiàn)有技術(shù)多是采用再生纖維素與其他材料共混，冷凍干燥制備復(fù)合膜，采用此方法制得的復(fù)合膜均勻性、穩(wěn)定性較差，且組織修復(fù)能力及藥物附著性有待進(jìn)一步的提高。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提供了一種具有良好的組織修復(fù)能力及藥物附著性的羅非魚皮膠原蛋白復(fù)合再生纖維修復(fù)材料的制備方法。

本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種羅非魚皮膠原蛋白復(fù)合再生纖維修復(fù)材料的制備方法，包括以下步驟：

步驟一：羅非魚皮去鱗，去離子水反復(fù)沖洗干凈后用濾紙吸干表面水分，脂肪酶脫脂處理羅非魚皮，脫脂后的魚皮用0.1mol/LNaOH浸泡，除去雜蛋白，再用去離子水反復(fù)清洗魚皮，直至洗液呈中性；

步驟二：將經(jīng)步驟一處理后的魚皮加入到4℃、pH2.3、質(zhì)量濃度80％的乳酸溶液中，料液比為1:20，充分提取12h后，4℃、5000r/min離心處理40min，取上清液，加入NaCL至0.9mol/L，鹽析10h，待膠原蛋白沉淀析出后，4℃、5000r/min離心處理20min，取沉淀，棄去上清液；

步驟三：將沉淀復(fù)溶于0.1mol/L乳酸溶液中，料液比為1:10，4℃、5000r/min離心處理20min，棄去沉淀，取上清液進(jìn)行透析，先用0.1mol/L乳酸溶液透析2d，每4h換一次透析液，再用蒸餾水透析，每4h換一次蒸餾水，直到透析液中不存在氯離子且透析液為中性時(shí)，停止透析，最后經(jīng)冷凍干燥后得羅非魚皮膠原蛋白；

步驟四：稱取20g竹纖維，投入到400g、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為17.5％的NaOH溶液中，并放置到溫度為100℃的恒溫水浴鍋中，沸煮60min，再用去離子水對竹纖維反復(fù)清洗至中性；

步驟五：取16gLiCl投入到裝有40℃、184g二甲基乙酰胺的容器中，在恒溫磁力攪拌器的作用下使LiCl充分溶解，配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8％的溶劑，取溶劑100g、竹纖維15g，60℃恒溫水浴鍋中、混合攪拌8h，過濾得竹纖維溶液；

步驟六：將蠶繭去蛹，置入煮沸的質(zhì)量濃度為0.5％的碳酸鈉水溶液中，浴比為1:50，除去蠶繭表面絲膠,將已成絲狀的蠶繭撈出并擰干，再重復(fù)上述操作一次后，用去離子水洗凈，風(fēng)干后得到脫膠絲素；

步驟七：將CaCl₂在室溫狀態(tài)下溶解于甲酸中，攪拌30min，制得濃度為5wt.％的CaCl₂-FA溶液，然后將脫膠絲素溶解于CaCl₂-FA溶液中，磁力攪拌3h，獲得再生絲素蛋白溶液，室溫下干燥成膜，將膜用去離子水浸泡3h，再干燥，獲得再生絲素蛋白膜，將再生絲素蛋白膜在室溫狀態(tài)下二次溶解于甲酸中，浴比為1:10，溶解時(shí)間為2h，得再生絲素蛋白紡絲液；

步驟八：取棉短絨5g，將其溶解在甲酸中，配制成質(zhì)量濃度4％的纖維素溶液；

步驟九：將再生絲素蛋白紡絲液與纖維素溶液按重量比4:1混合均勻得再生纖維素紡絲液；

步驟十：將羅非魚皮膠原蛋白、竹纖維溶液、再生纖維素紡絲液按質(zhì)量比2:4:19混合均勻，使用超聲波震蕩對其進(jìn)行分散，50℃條件下磁力攪拌1h，再在室溫下繼續(xù)攪拌8h，得到粘稠溶液置于與高壓裝置連接的醫(yī)用針管中，通過靜電紡絲制得修復(fù)材料，高壓裝置電壓為20kV，紡絲流量2ml/h，將制得的材料置于體積濃度75％乙醇中浸泡30min，在40℃下真空干燥。

優(yōu)選的，步驟十中所述的醫(yī)用針管的容量為30ml。

優(yōu)選的，步驟十中所述的醫(yī)用針管的針頭固定在距離靜電紡絲接收板30cm處。

優(yōu)選的，步驟十中所述的醫(yī)用針管的針頭內(nèi)徑為0.41mm。

本發(fā)明的有益效果在于：

1)羅非魚皮膠原蛋白中含有促細(xì)胞生長因子和表皮生長因子，對修復(fù)機(jī)體和護(hù)養(yǎng)皮膚大有好處。

2)絲素蛋白及竹纖維具有良好的抗菌性及生物相容性。

3)纖維素具有良好的生物相容性、可降解性及優(yōu)良的機(jī)械性能。

4)纖維素可以改善材料的機(jī)械性能，絲素蛋白可以改善材料的組織修復(fù)能力。

5)采用靜電紡絲技術(shù)制備的材料，進(jìn)一步提高了材料的孔隙率，有利于藥物的附著。

具體實(shí)施方式