[發明專利]USBU無福爾馬林固定液及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201710398661.8
• 申請日: 2017-05-31
• 公開（公告）號: CN108967414A
• 公開（公告）日: 2018-12-11
• 發明（設計）人: 王虎;王星倫;野口光一
• 申請（專利權）人: 王虎
• 主分類號: A01N1/00
• 分類號: A01N1/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明是一種無福爾馬林的人體和動物標本固定液。USBU?無福爾馬林固定液的主要成分是：乙醇、異丙醇、乙二醇、丙三醇、季戊四醇、3,4?二羥基苯乙醇、無水磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉配制而成。本發明充分發揮了多羥基復合醇固定細胞組織的特性，即能充分固定人體或動物標本組織而又不破壞細胞結構和DNA、RNA信息，本發明更有意義的是能從根本上解決了福爾馬林給科學研究者自身帶來的毒害。

技術領域

本發明涉及人體和動物標本組織固定液及其制備方法和應用領域，特別涉及到一種無福爾馬林固定液標本的環保、安全處理方法及其應用。

背景技術

260年前，德國科學家發明了福爾馬林用于固定保存人體和動物標本組織，由于福爾馬林可以長期保存珍貴標本，在全世界的醫學和生物研究中被廣泛應用。福爾馬林固定標本的優勢是由于福爾馬林具有較強的反應活性和化學應基，可以和帶有—OH（羥基）、—SH（巰基）、—NH2（氨基）基團的分子發生親核反應，最終作為亞甲基（—CH2—）的提供者，與上述基團中的兩個基團反應，使自由的分子鏈被福爾馬林交聯起來，被固定組織失去原有的生理功能。人體的細胞和酶系統存在著大量的羥基、巰基、氨基，接觸福爾馬林后會立即發生反應，形成立體交聯，產生蛋白質變性，福爾馬林與標本的大分子之間形成三維的空間結構，可以達到長期保存標本的目的；雖然福爾馬林在全世界病理實驗室得到應用和推廣，但是，福爾馬林固定標本也給人類帶來了極大的危害。

（1）福爾馬林是一種有毒性的，致癌性很強的試劑。世界衛組織自2006年10月，把它列為呼吸道病變，過敏和呼吸道疾病，被列為致癌物質。

（2）標本使用福爾馬林固定，是醫學研究和分子生物學技術在識別靶向治療的病人分析中的一個主要障礙。由于醛基和固定組織的化學反應－三維醛基結構，嚴重地干擾了檢測信號。

（3）福爾馬林的化學作用，嚴重地與DNA，RNA和蛋白質結合，使組織很難甚至是不可能的提取充足的DNA,RNA,不能精確預測癌癥細胞的突變的位點，限制了病理診斷和藥物開發的準確性和精確度。

本發明USBU無福爾馬林固定液是福爾馬林固定液的替代產品，它不但保護了人體和動物標本組織結構和細胞的形態和DNA、RNA的分子結構不變，而且是對人類安全環保的綠色產品。

發明內容

本發明提供USBU無福爾馬林固定液及其制備方法和應用，其USBU無福爾馬林固定液選用多羥基醇作為主要成分：異丙醇、乙醇、乙二醇、丙三醇、季戊四醇、3,4-二羥基苯乙醇、無水磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉混合而成。應用以上的固定液可固定人體和動物組織標本，固定后的標本可以應用到普通形態學圖像診斷、免疫組織化學（抗原與抗體結合）的圖像診斷、信息RNA的原位雜交實驗、PCR、DNA抽取與測序、RNA的抽取等生物醫學診斷與研究。USBU無福爾馬林保護病理標本的固定液是一種新型的對DNA和RNA有高保護性的固定液，保護了DNA，RNA以及細胞結構，保存完整的組織信息，有助于臨床病理診斷和細胞靶向精確定位的生物醫學研究。

附圖為USBU無福爾馬林固定液與福爾馬林固定液對照組比較的結果

圖1是HE形態結構圖像

圖2是免疫組織化學(Immunohistochemistry)形態成像

圖3是原位雜交（in situ hybridization）信號成像

圖4是DNA抽取

圖5是RNA抽取

圖6是無福爾馬林固定組織芯片

本發明的實施步驟如下：

實施例一

按體積百分比

乙醇 40 %