[發明專利]從綠茶中分離純化表沒食子兒茶素單體的方法

在審

• 申請號: 201710396540.X
• 申請日: 2017-05-31
• 公開（公告）號: CN106995427A
• 公開（公告）日: 2017-08-01
• 發明（設計）人: 吳世華;葉艷;羅祥;馬松
• 申請（專利權）人: 湖北中鑫生物科技有限公司
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62
• 代理公司: 十堰博迪專利事務所42110
• 代理人: 高良軍

技術領域

本發明屬于醫藥化工技術領域,涉及從綠茶中分離純化表沒食子兒茶素單體的方法。

背景技術

EGC和EGCG是茶葉中的主要兒茶素之一，占茶多酚總量的80％以上，作為天然抗氧化劑和自由基清除劑，具有明顯的抗衰老、抗突變、防癌抗癌、預防心血管疾病、防輻射等多種生物學活性，廣泛運用于食品加工、醫藥保健和日用化工領域。目前分離制備兒茶素單體的方法有很多，主要有柱色譜法、柱色譜預分離-制備型HPLC純化法、有機溶劑富集-柱色譜純化、高效液相色譜法、高速逆流色譜法(HSCCC)、沉淀-吸附法、有機溶劑萃取法等，然而這些方法大多集中用于分離純化EGCG，對于EGC的分離研究還很少見，而且在降低成本、提高得率、保持產物的天然活性以及實現工業化等方面依然存在 技術瓶頸。EGC作為在綠茶中的一種主要成分，在誘導乳腺癌細胞凋亡食品抗氧化、抑菌上具有顯著功效，美國食品和藥物管理局(FDA) 批準兒茶素作為新的處方藥。

發明內容

本發明是提供從綠茶中分離純化表沒食子兒茶素單體工藝方法，該工藝簡便，單體提取率及產品純度高，制備周期短，成本低，易于實現工業化生產。

本發明提供的技術方案是：從綠茶中分離純化表沒食子兒茶素單體的方法，包括如下步驟：

（1）提取：稱取綠茶原料，加入12-15倍的80～95℃熱水，連續逆流提取45分鐘；

（2）離心過濾，得到綠茶提取液；

（3）色譜分離：將綠茶提取液上柱，用吸附樹脂色譜分離，收集解析液，回收乙醇，回收乙醇后的解析液濃縮至固含量25-35%，得濃縮液；

（4）將上述第（3）步驟的濃縮液，放置于2-6℃溫度下結晶24-48小時，用水洗后為白色晶體，將白色晶體冷凍干燥得到的產品即為表沒食子兒茶素單體。

對上述技術方案的進一步限定：第（1）步驟中，所述的綠茶原料為大葉種綠茶。

對上述技術方案的進一步限定：第（3）步驟中，上柱流速：1.0 BV/h ；解吸：先用2BV 的20%乙醇洗脫，再用2BV的80%乙醇洗脫，解吸流速均為0.8BV/h。

對上述技術方案的進一步限定：第（3）步驟中，所述的吸附樹脂為LX-8，HP20、聚酰胺或DM310之一。

本發明具有以下有益效果：本發明方法以綠茶為原料，從綠茶中分離純化表沒食子兒茶素（EGC 純度>98%）單體，對產品分離純化工藝流程進行優化設計，工藝更加簡單，單體提取率及產品純度高。產品生產過程只使用水跟乙醇，產品安全，生產更加環保。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本工藝進行詳細的說明。

實施例1

將100kg綠茶中加入1500L的90℃熱水中，保持溫度90℃，提取45分鐘；料液冷卻至40℃后離心過濾；濾液上LX-8樹脂柱，上柱流速：1.0 BV/h ；料液上完后再純水水洗1BV，再用2BV的20%乙醇洗脫，收集洗脫液濃縮回收乙醇。最后用2BV 的80%乙醇洗脫，解吸流速均為 0.8BV/h，將80%洗脫液回收乙醇后濃縮至固含量30%，放置于4℃溫度下結晶24小時，用水洗后為白色晶體冷凍干燥即為產品，經HPLC檢測EGC含量95.9%。

實施例2

將100Kg綠茶中加入1500L的90℃熱水中，保持溫度90℃，提取45分鐘；料液冷卻至40℃后離心過濾；濾液上HP20樹脂柱，上柱流速：1.0 BV/h ；料液上完后再純水水洗1BV，再用2BV 20%乙醇洗脫，收集洗脫液濃縮回收乙醇。最后用2BV 80% 乙醇洗脫，解吸流速均為 0.8BV/h，將80%洗脫液回收乙醇后濃縮至固含量30%，放置于4℃溫度下結晶24小時，用水洗后為白色晶體冷凍干燥即為產品，經HPLC檢測EGC含量93.5%。

實施例3

將100kg綠茶中加入1500L90℃熱水，保持溫度90℃，提取45分鐘；料液冷卻至40℃后離心過濾；濾液上聚酰胺樹脂柱，上柱流速：1.0 BV/h ；料液上完后再純水水洗1BV，再用2BV 20%乙醇洗脫，收集洗脫液濃縮回收乙醇。最后用2BV 80% 乙醇洗脫，解吸流速均為 0.8BV/h，將80%洗脫液回收乙醇后濃縮至固含量30%，放置于4℃溫度下結晶24小時，用水洗后為白色晶體冷凍干燥即為產品，經HPLC檢測EGC含量91.4%。

實施例4

將100kg綠茶中加入1500L的90℃熱水，保持溫度90℃，提取45分鐘；料液冷卻至40℃后離心過濾；濾液上DM310樹脂柱，上柱流速：1.0 BV/h ；料液上完后再純水水洗1BV，再用2BV 20%乙醇洗脫，收集洗脫液濃縮回收乙醇。最后用2BV 80% 乙醇洗脫，解吸流速均為 0.8BV/h，將80%洗脫液回收乙醇后濃縮至固含量30%，放置于4℃溫度下結晶24小時，用水洗后為白色晶體冷凍干燥即為產品，經HPLC檢測EGC含量97.9%。