[發明專利]一種羊抗人血清制備抗原免疫劑量的精準確定方法

有效

• 申請號: 201710391911.5
• 申請日: 2017-05-27
• 公開（公告）號: CN107216386B
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發明（設計）人: 袁金城;江曉
• 申請（專利權）人: 海奧斯生物科技鎮江有限公司
• 主分類號: C07K16/06
• 分類號: C07K16/06
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 王云

本發明公開了一種羊抗人血清制備抗原免疫劑量的精準確定方法，包括以下步驟：（1）第一次免疫抗原劑量確定：基準量：羊體重的十億分之八的量計算；基礎量對應：蛋白抗原分子量50KD，當抗原蛋白分子量小于50KD，或大于50KD時，增加調節系數調整抗原免疫劑量；（2）第二次免疫劑量是第一次的2倍；（3）第三次的免疫劑量都是第二次的2倍量；（4）第四次至最后一次免疫，其免疫劑量都是與第三次一致。本發明的優點在于：使免疫抗原量在原來教科書含糊不清的表述中得以清晰；便于精準操作；為生物科技動物抗血清制備工業化生產奠定基礎；抗原的價格昂貴，可以最大程度減少抗原免疫劑量，節約生產成本；精準免疫，使抗血清效價更高。

技術領域

本發明屬于生物工程領域，具體涉及一種羊抗人血清制備抗原免疫劑量的精準確定方法。

背景技術

抗原和抗體是免疫學檢驗的兩大重要因素，也是整個免疫反應的基本條件。抗原的純化是制備特異性抗的先決條件，制得的抗體可用于純化抗原和檢測抗原。抗體有單克隆和多克隆兩類。

抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清，一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。高效價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。一種抗原能否引起抗體生成反應，一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇(Antigenicdeterminant)，另一方面取決于機體的免疫狀態，當具備以上兩個條件后，抗體生成將遵循抗體生成的一般規律——初次反應和再次反應。抗原的種類繁多，包括天然的蛋白質抗原和細胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等，不同的抗原免疫動物具有不同的特殊性。一般完全抗原免疫動物需加用佐劑，尤其在使用可溶性抗原時，以期得到高效價的抗血清；合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物質需先通過人工的方法與蛋白質載體連接后再與佐劑混合免疫動物，方可獲得理想的免疫效果。使用佐劑后可增加抗原的免疫原性和延長抗原在機體內存留的時間，從而改變了抗原原有的免疫原性。

在抗血清制備的過程中，免疫原的注射劑量應考慮其抗原性的強弱、分子量大小、動物的個體狀態和免疫時間。對于純的可溶性抗原的免疫劑量，通常小鼠首次抗原劑量為50～100μg/次，大鼠為100～200μg/次，兔為100μg～1mg/次，合成免疫原為2mg(半抗原約為20～200μg)，一般需要與等量的福氏完全佐劑混合。加強免疫的劑量為首次計量的1/2，通常用不完全福氏佐劑或不用佐劑。如需制備高度特異性的抗血清，可選用低劑量抗原短程免疫法；反之，欲獲得高效價的抗血清，需采用大劑量抗原長程免疫法。

目前的方法中所采用的免疫抗原的價格昂貴，抗血清效價低。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種能精準操作，節約生產成本，抗血清效價高，并能工業化生產的羊抗人血清制備抗原免疫劑量的精準確定方法。

為達到上述目的，本發明是通過以下的技術方案來實現的。

一種羊抗人血清制備抗原免疫劑量的精準確定方法，包括以下步驟：

(1)第一次免疫抗原劑量確定：

基準量：羊體重十萬分之八的量計算；

基礎量對應：蛋白抗原分子量50KD，

當抗原蛋白分子量小于50KD，或大于50KD時，增加調節系數調整抗原免疫劑量；

(2)第二次免疫劑量是第一次的2倍；

(3)第三次的免疫劑量都是第二次的2倍量；

(4)第四次至最后一次免疫，其免疫劑量都是與第三次一致。

進一步地，步驟(1)中，當抗原蛋白分子量小于50KD，增加調節系數的抗原量，最大至1mg。增量調節系數＝(50-抗原分子量KD)/100。