[發明專利]一種P蛋白突變構建的基因VII型新城疫病毒弱毒株有效
| 申請號： | 201710388556.6 | 申請日： | 2017-05-27 |
| 公開（公告）號： | CN107058244B | 公開（公告）日： | 2020-11-06 |
| 發明（設計）人： | 李明義;孫化露;金紅巖;李思菲;于澤坤;畢云英;劉陽;單學強;欒志舫;馬禮照;李朝陽 | 申請（專利權）人： | 山東信得科技股份有限公司;青島信得藥業有限公司 |
| 主分類號： | C12N7/00 | 分類號： | C12N7/00;C12N15/85;A61K39/17;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 湯東鳳 |
| 地址： | 262200 山東省濰坊市*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 蛋白 突變 構建 基因 vii 新城 疫病 毒弱毒株 | ||
【權利要求書】：
1.一種弱毒株，其特征在于，所述的弱毒株是將VII型新城疫病毒的P蛋白的237位和240位的氨基酸分別突變為蘇氨酸T和異亮氨酸I，再通過反向遺傳操作方法來構建的；
所述的反向遺傳操作方法，其包括如下的步驟：
構建表達T7 RNA聚合酶的細胞系、
提供基因VII型新城疫病毒NDV拯救過程中需要的三個輔助重組質粒和一個全基因組重組載體，三個輔助重組質粒分別包含NDV的NP蛋白、P蛋白和L蛋白基因；其中P蛋白的237位和240位的氨基酸分別為T和I；
將三個輔助重組質粒和一個全基因組重組載體轉入到表達T7 RNA聚合酶的細胞系中，培養獲得基因VII型新城疫病毒弱毒株；
所述的弱毒株的保藏編號為CCTCC NO:V201710。
2.如權利要求1所述的弱毒株，其特征在于，所述的細胞系，是將表達T7RNA聚合酶的基因與載體PCI-neo連接后轉染DF1細胞獲得的。
3.權利要求1-2任一項所述的弱毒株在制備疫苗中的應用。
4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，所述的疫苗為滅活疫苗。
5.一種VII型新城疫疫苗，其特征在于，所述的疫苗的抗原為權利要求1-2任一項所述的弱毒株。
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