[發明專利]一種采血管及其應用

有效

• 申請號: 201710388223.3
• 申請日: 2017-05-27
• 公開（公告）號: CN107201307B
• 公開（公告）日: 2019-09-13
• 發明（設計）人: 張鏡懸
• 申請（專利權）人: 廣州基賽生物科技有限公司
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12M1/24;C12Q1/686;C12N15/10;A61B5/15
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 郝文婷

本發明公開了一種采血管及其應用。采血管內有一段DNA作為質控標準品，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，采血管內還包括穩定保護劑，所述穩定保護劑包括甲醛釋放劑、防腐劑、抗凝劑和氯化鹽。本發明采血管可以實現常溫條件下對樣品特別是血漿中游離DNA的穩定保存，還可長期有效對采血管的性能進行監測，排查樣本溶血因素，便于采血管的質控管理，避免因采血管質量不穩定引起的問題，且對后續檢測結果無影響，可應用于實驗室、醫療等多個領域的生物檢測中，具有良好的應用價值。

技術領域

本發明屬生物檢測技術領域，更具體地說，本發明涉及一種能在常溫條件下對血漿中游離DNA的保存和運輸且對后續檢測結果無影響，同時可實現質控管理的采血管。

背景技術

隨著二代基因測序技術的快速發展，基于基因測序技術的無創產前診斷已成為胎兒遺傳病診斷領域的有力手段。無創產前診斷主要是利用孕婦血漿中游離胎兒DNA進行特異的產前篩查和診斷，但是，孕婦血漿中胎兒游離DNA的含量極少，僅占總游離DNA的約5～7％，且極易收到母體有核細胞破裂釋放出的染色體DNA污染和細胞內高濃度的DNA酶降解。

目前針對游離DNA，如cfDNA和ctDNA的檢測中，血樣采集、運輸和保存多使用特殊采血管，但均存在以下局限性：首先，僅有抗凝劑的采血管，對儲存和運輸條件的要求苛刻，血液樣本不易保存，且保存時間有限，不利于邊遠地區進行采樣；其次，含有血細胞保護劑、游離DNA保護劑、抗凝劑的采血管，可有效對游離DNA進行保護，也可以在常溫條件下進行運輸，但采血管自身檢測和監測尚為空白。現在對采血管的質控監測多采用物理、外觀、負壓等方式，監測結果的有效性和穩定性不佳。

有鑒于此，確有必要提供一種既能在常溫條件下對血漿中游離DNA進行保存和運輸且對后續檢測結果無影響，同時可實現質控管理的采血管。

發明內容

本發明的目的在于：克服現有采血管存在的缺陷，提供一種既能在常溫條件下對血漿中游離DNA進行保存和運輸且對后續檢測結果無影響，同時可實現質控管理的采血管。

為了實現上述發明目的，本發明提供了一種采血管，其內有一段DNA作為質控標準品，核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，采血管內還包括穩定保護劑，所述穩定保護劑包括甲醛釋放劑、防腐劑、抗凝劑和氯化鹽。

作為本發明采血管的一種改進，所述質控標準品為液體或干粉。

作為本發明采血管的一種改進，所述甲醛釋放劑為雙羥甲基咪唑烷基脲，所述防腐劑為苯甲酸鈉，所述抗凝劑為乙二胺四乙酸三鉀，所述氯化鹽為氯化鈉。

作為本發明采血管的一種改進，所述質控標準品和所述穩定保護劑在采血管中的總體積為51～600μL。

作為本發明采血管的一種改進，所述質控標準品的濃度為1～10pmol/μL，所述質控標準品的添加量為1～300μL，所述穩定保護劑的添加量為50～300μL；按質量百分比計，所述穩定保護劑包括：去離子水60～70％，甲醛釋放劑8～15％，防腐劑8～15％，抗凝劑5～8％，氯化鹽0.1～2％。

作為本發明采血管的一種改進，質控標準品的制備方法包括：化學合成特定的單鏈核酸序列如SEQ ID NO:1所示；將SEQ ID NO:1所示序列合成雙鏈DNA，采用聚丙烯酰胺膠純化回收，12000r/min離心10min，加入去離子水梯度稀釋至所需濃度。

作為本發明采血管的一種改進，所述穩定保護劑的制備方法包括：按照比例稱取甲醛釋放劑、防腐劑、抗凝劑和氯化鹽混合攪拌，加入去離子水定容。

作為本發明采血管的一種改進，所述質控標準品和所述穩定保護劑在采血管中混合，pH值為7.0。

本發明采血管可用于生物檢測中，特別適合于采集、保存和運輸孕婦血漿。

相對于現有技術，本發明采血管及其應用具有如下優點：