[發明專利]金毛狗脊中糖聚合物及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201710386921.X
• 申請日: 2017-05-26
• 公開（公告）號: CN107236050A
• 公開（公告）日: 2017-10-10
• 發明（設計）人: 嚴春艷;黃冬
• 申請（專利權）人: 廣東藥科大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61K31/702;A61P19/10;A23L33/125
• 代理公司: 廣州勝沃園專利代理有限公司44416
• 代理人: 張帥

1.金毛狗脊糖聚合物，其特征在于，所述金毛狗脊糖聚合物包括金毛狗脊糖聚合物CBP-1和金毛狗脊糖聚合物CBP-2，所述金毛狗脊糖聚合物CBP-1由葡萄糖和甘露糖組成的糖聚物，其結構為：

其中n的范圍為1～30；

所述金毛狗脊糖聚合物CBP-2是由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖組成的糖聚物，其結構為：

其中x，y，z，m的范圍分別為1～30。

2.如權利要求1所述的金毛狗脊糖聚合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1切塊：將金毛狗脊干燥根莖切成塊，得金毛狗脊塊狀物，將上述金毛狗脊塊狀物用水洗凈，然后浸泡5～15h，得浸泡后金毛狗脊塊狀物；

S2水提：將步驟S1所得金毛狗脊塊狀物進行水提，水提時水的量為上述金毛狗脊塊狀物重量的5～20倍，水提時水的溫度為60～100℃，水提時間為1～10h，收集提取液，藥渣晾干；

S3堿提：將步驟S2所得藥渣浸沒于濃度為0.1～1M的NaOH溶液中，NaOH溶液的量為上述藥渣重量的10～20倍，室溫放置2～20h，取上清液，將上清液用HCl溶液進行中和，使其pH為5～9，取上清液進行離心，離心速度為4500～5600r/min，離心時間為8～13min，取上清液，60℃減壓濃縮，然后加入乙醇使乙醇體積濃度為60～85％，靜置24h后離心，收集沉淀，得堿提粗糖聚合物CB4；

S4純化：利用Sevag法對步驟S3所得堿提粗糖聚合物CB4進行除蛋白，將除蛋白后的堿提粗糖聚合物CB4用透析袋進行透析、凍干，即得金毛狗脊糖聚合物CB4；

S5離子交換柱層析：將步驟S4所得金毛狗脊糖聚合物CB4溶于去離子水中，上樣于DEAE-Cellulose 52柱，在不同鹽濃度的洗脫液條件下出現2個峰，其中峰一為水(0M NaCl)洗脫部分，峰二為0.05M NaCl洗脫部分，洗脫過程中使用苯酚-硫酸法跟蹤洗脫曲線，根據洗脫曲線分別收集糖部分，分別將所得洗脫液濃縮、冷凍干燥后，得峰一糖聚合物和峰二糖聚合物；

S6分子篩凝膠柱層析：將步驟S5所得峰一糖聚合物樣品，用水進行溶解，離心，取上清液，上Sephadex G-75柱，用水進行洗脫，采用苯酚-硫酸法跟蹤洗脫曲線，出現一個單一對稱峰，收集主峰，濃縮，冷凍干燥，得金毛狗脊糖聚合物CBP-1；同樣地，將步驟S5所得峰二糖聚合物樣品，用水進行溶解，離心，取上清液，上Sephadex G-75柱，用水進行洗脫，采用苯酚-硫酸法跟蹤洗脫曲線，出現一個單一對稱峰，收集主峰，濃縮，冷凍干燥，得金毛狗脊糖聚合物CBP-2。

3.如權利要求2所述的金毛狗脊糖聚合物的制備方法，其特征在于，所述步驟S1浸泡12h。

4.如權利要求2所述的金毛狗脊糖聚合物的制備方法，其特征在于，所述步驟S2水提時水的添加量為上述金毛狗脊塊狀物重量的10倍，水提時水的溫度為85℃，水提時間為2h。

5.如權利要求2所述的金毛狗脊糖聚合物的制備方法，其特征在于，所述步驟S3中將步驟S2所得藥渣浸沒于濃度為0.3M的NaOH溶液中，NaOH溶液的量為上述藥渣重量的15倍，室溫放置3h，取上清液，將上清液用濃度為0.5M的HCl溶液進行中和，使其pH為7，取上清液進行離心，離心速度為5000r/min，離心時間為10min，取上清液，60℃減壓濃縮，然后加入乙醇使乙醇體積濃度為75％。

6.如權利要求2所述的金毛狗脊糖聚合物的制備方法，其特征在于，所述步驟S4所述透析袋的截留分子量為1000Da。

7.如權利要求1所述的金毛狗脊糖聚合物在制備防治骨質疏松的藥物或保健食品或功能食品中的應用。